盐酸克伦特罗(Clenbuterol，CL)通常被我们称为“瘦肉精”或者是“营养重分配剂”，它是一种选择性β-肾上腺受体激动素，可以明显的提高动物的生长速度，减少动物机体内脂肪的合成，经常会被不法商贩用作饲料添加剂来谋取经济利益。盐酸克伦特罗进入机体后很容易被吸收，并且在体内的半衰期比较长，容易在动物体内蓄积残留，人食用了残留有盐酸克伦特罗的肉类产品之后，会导致不同程度的中毒现象，所以该药物被禁止使用于在食品生产过程中使用。检测盐酸克伦特罗在食品中残留的方法有很多种，包括理化检测方法，免疫学检测方法和生物传感器技术，其中酶联免疫吸附技术(ELISA)具有高灵敏度、可定量、操作简便、成本低等特点，在药残检测中得到了广泛的应用，并得到了迅速的发展。由于盐酸克伦特罗的分子量只有313.7，属于小分子半抗原，只有反应原性，而不具备免疫原性，因此本实验首先利用重氮化方法将盐酸克伦特罗小分子与大分子载体牛血清蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)相连，合成了人工抗原CL-BSA和CL-OVA，其偶联比分别为27.4:1和12.0:1，并且应用了SDS-PAGE凝胶电泳和紫外扫描的方法对得到的偶联物进行了鉴定，电泳的鉴定结果显示了偶联物的分子量明显比载体蛋白的分子量要大，紫外扫面的鉴定结果显示了偶联物的吸收峰包含了盐酸克伦特罗和大分子载体蛋白的紫外扫描特征峰，并且在该基础上出现了一定的偏移；由此可以证明人工抗原偶联成功。用人工抗原CL-BSA免疫BALB/c小鼠，免疫完成后，采用间接ELISA的方法测定小鼠多抗血清(pAb)的抗体效价，并且利用了间接竞争ELISA的方法对pAb的敏感性进行了测定。测定结果显示，小鼠多抗血清的效价可以达到1:12800，血清敏感性测定实验也显示了小鼠多抗血清产生了针对CL的抗体，计算所得IC50为160ng/mL，由此进一步证实了人工抗原偶联成功。挑选血清效价高、敏感性良好的2号BALB/c小鼠来做细胞融合实验，将小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞NS0在PEG的作用下进行融合，获得杂交瘤细胞，并利用间接ELISA方法和间接竞争ELISA方法对获得的杂交瘤细胞株进行筛选，成功获得了一株抗盐酸克伦特罗的杂交瘤细胞株2E8，其上清的IC50为37.28ng/mL。本实验成功制备了盐酸克伦特罗的免疫原CL-BSA及包被原CL-OVA，并通过细胞融合实验获得了一株抗盐酸克伦特罗的杂交瘤细胞株，为盐酸克伦特罗单克隆试剂盒的制备奠定了基础。