胸腺肽(Thymosin β4，TB4)和(Thymosin β10，TB10)除了有免疫活性外，在新生血管形成、细胞迁移、创口愈合等方面也着重要作用。新生血管的形成是恶性肿瘤的生长、浸润和转移物质基础，阻止新的血管网络形成可以有效的治疗肿瘤，因而胸腺肽引起了研究者广泛的兴趣。本文在大肠杆菌中克隆表达了人源的TB4和TB10，及其变体TAT—TB4和TAT—TB10，并对它们的活性作了初步检测。人工合成TB4和TB10寡核苷酸片断，运用分子克隆的方法拼接成TB4和TB10基因片断，插入pET28a(+)载体His6-Tag下游位点，筛选得到重组表达质粒，转入大肠杆菌BL21(DE3)中，IPTG诱导表达。通过镍柱亲和层析纯化得到带有His6-Tag的融合蛋白。经MTT和CAM活性实验检测表明，TB4促进淋巴细胞增值和新血管形成，TB10则抑制淋巴细胞增值和新血管生成。TAT变体由于N端添加了可以将蛋白带入细胞的TAT穿膜短肽使得效果更为显著。同时，为排除His6-Tag对蛋白活性的影响，我们还尝试了在His6-Tag和胸腺肽之间分别插入了EK肠激酶切位点和TEV酶切位点。实验结果表明，由于胸腺肽的结构特征，EK酶切效果不好，而TB10和TAT—TB10的融合蛋白加入TEV酶切位点后，则能很好地去除His6-Tag，得到非融合的蛋白TB10和TAT—TB10，其抑制新血管生成的活性有了显著的提高。