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目的：以急性早幼粒性白血病细胞株NB4为研究对象，探讨亚砷酸钠及其中间代谢产物单甲基亚砷酸（MMA~Ⅲ）、二甲基亚砷酸（DMA~Ⅲ)作用于NB4细胞后与自噬的关系，进一步研究其作用机理。方法：常规培养NB4细胞，取生长良好、状态一致的NB4细胞，随机分为四组（Con组，iAs~Ⅲ组，MMA~Ⅲ组，DMA~Ⅲ组），加入浓度为1μM的对应三种砷化合物，处理不同时间后，透射电镜、Western-blot和免疫荧光等方法检测不同砷化合物对NB4细胞作用与自噬的关系。Western-blot法检测自噬相关蛋白表达。结果：前期研究结果中MTT结果显示，三种砷化合物（iAs~Ⅲ，MMA~Ⅲ和DMA~Ⅲ）中，二甲基中间代谢产物DMA~Ⅲ对NB4细胞的毒性最大，其次为一甲基中间代谢产物MMA~Ⅲ，iAs~Ⅲ对NB4细胞的毒性最小。前期研究显示iAs~Ⅲ可以降解急性早幼粒细胞性白血病（Acute PromyeloidLeukaemia，APL）特异性融合蛋白PML/RARα，诱导细胞分化成正常细胞；单甲基代谢产物MMA~Ⅲ及二甲基代谢产物DMA~Ⅲ处理NB4细胞后，未能降解融合蛋白PML/RARα，而是诱导细胞产生凋亡。前期研究结果显示砷中间代谢产物MMA~Ⅲ通过作用于线粒体引起细胞凋亡，而DMA~Ⅲ通过内质网应激引起细胞凋亡。当加入凋亡抑制剂后，发现并不能完全逆转两种代谢产物引起的细胞凋亡，提示我们除了线粒体与内质网途径引起的凋亡以外，还可能存在另外一种凋亡方式诱导细胞凋亡。细胞在受到刺激后可以发生自噬性凋亡，因此我们推测砷中间代谢产物可能诱导细胞发生了自噬性凋亡。有文献报道[1]，iAs~Ⅲ处理NB4细胞后，通过自噬途径降解PML/RARα融合蛋白。透射电镜结果显示，经亚砷酸钠及其代谢产物处理NB4细胞后，均可见明显的自噬泡。Western-blot检测自噬相关蛋白LC3B及Beclin-1，经iAs~Ⅲ处理的NB4细胞均有显著表达，而MMA~Ⅲ及DMA~Ⅲ处理过NB4细胞后，自噬相关蛋白出现一过性显著表达，两者之间有显著性差异。共聚焦显微镜观察结果显示，对照组LC3B与PML没有良好重叠，而iAs~Ⅲ处理后LC3B与PML有良好的重叠；MMA~Ⅲ及DMA~Ⅲ处理过NB4细胞后，LC3B与PML也没有良好重叠。由此提示iAs~Ⅲ处理NB4细胞后发生了自噬现象，而MMAШ及DMA~Ⅲ处理后虽然发生了自噬现象，但不能降解融合蛋白。为了研究三种不同砷化合物作用NB4细胞后发生自噬的相关机制，我们探讨了自噬通路相关蛋白p-Akt473、p-mTOR的表达，结果显示经过iAs~Ⅲ处理NB4细胞后P-Akt473表达量一过性升高，p-mTOR12h后明显下调；MMA~Ⅲ作用于NB4细胞后，p-Akt473表达量呈现时间依赖性减少，p-mTOR12h后明显下调；DMA~Ⅲ作用于NB4后，P-Akt473表达量一过性升高，p-mTOR24h后明显下调。结果提示，iAs~Ⅲ、MMA~Ⅲ及DMA~Ⅲ诱导细胞自噬均与p-Akt及m-TOR有关，iAs~Ⅲ及DMA~Ⅲ可能通过一过性激活PI3K/Akt--mTOR进而抑制此通路启动自噬。MMA~Ⅲ通过抑制Akt的磷酸化诱导自噬短暂发生。结论：由以上结果提示，三种不同的砷化合物作用于NB4细胞后，亚砷酸iAs~Ⅲ可能通过自噬降解APL特异性融合蛋白PML/RARα，其机制可能与一过性激活PI3K/Akt-mTOR进而抑制此通路诱导自噬有关；单甲基代谢产物MMA~Ⅲ通过抑制Akt的磷酸化诱导自噬短暂发生；二甲基代谢产物DMA~Ⅲ一过性激活PI3K/Akt-mTOR进而抑制此通路诱导自噬，但不能降解PML/RARα融合蛋白。