温郁金细菌性枯萎病菌的鉴定及其生防菌的筛选与应用研究

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由茄科劳尔氏菌(Ralstonia solanaceraum)引起的温郁金细菌性枯萎病对温郁金种植可造成毁灭性危害。本研究将实验室已经保存的解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens ZJU-C612-4和加米那类芽孢杆菌Paenibacillus jamilae ZJUC612-3按比例混合研制出抗温郁金细菌性枯萎病的生物有机肥。通过温室和田间试验研究了该生物有机肥对温郁金细菌性枯萎病的防病效果,并初步探讨了两者的机制,主要结果如下:1.利用选择性培养基M-SMSA从温郁金发病块茎中分离得到4株强致病力茄科劳尔氏菌菌株,根据形态特征、flic基因、egl基因系统发育分析及组培苗回接试验等方法,将菌株TSC7,TSC8,TSC9和TSC10鉴定为茄科劳尔氏菌R.solanacearum种系型Ⅰ;通过菌株对3种己醇和3种二糖氧化产酸能力的分析,将菌株TSC7,TSC8,TSC9鉴定为生化型4,将菌株TSC10鉴定为生化型3。2.从实验室保存的37株菌株中有8株对茄科劳尔氏菌TSC7有抑制作用,其中菌株ZJU-C612-3和ZJU-C612-4对茄科劳尔氏菌TSC7的抑菌圈分别达19.3mm和21.7 mm。经16SrRNA和生理生化试验,将菌株ZJU-C612-3鉴定为Paenibacillus jamilae,其具有蛋白酶、纤维素酶和嗜铁素活性,能产生丰富的杀镰孢菌素和多粘菌素;菌株ZJU-C612-3对N.parvum、P.capsisi、B.dothidea、F.graminearum、R.solani、A.tenuissima的抑菌率分别为65.88%、63.24%、60.59%、50.00%、45.12%、37.35%。解淀粉芽孢杆菌ZJU-C612-4具有很强的产蛋白酶活性,能产生各种杆菌霉素、表面活性素和丰源素;菌株ZJU-C612-4对N.parvum、B.dothidea、P.capsisi、F.graminearum、R.solani、A.tenuissima的抑菌率分别为72.06%、67.94%、65.29%、55.60%、54.97%、52.41%。3.将生防菌菌株ZJU-C612-3和ZJU-C612-4与有机肥二次固体发酵制成生物有机肥BOF,盆栽试验结果表明,施用500 kg/亩的BOF能显著降低温郁金细菌性枯萎病的发病率,防治效果达45.4%。田间试验结果表明,与复合肥相比,施用200 kg/亩BOF防效可达70%以上;与羊粪相比,施用200 kg/亩BOF能显著降低温郁金细菌性枯萎病的发病率。
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