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本文的一大板块研究了蒺藜皂苷对乳腺癌和肝癌细胞的抑制效应，选用蒺藜全草提取皂苷，在细胞水平和分子水平层面上着重研究了蒺藜皂苷对人乳腺癌细胞Bcap-37和肝癌细胞BEL-7402的体外抑制效应极其机理。 首先应用MTT法、考马斯亮蓝测蛋白法、SRB、生长曲线法观察了蒺藜皂苷(STT)体外对于Bcap-37和BEL-7402细胞生长的抑制作用，发现STT能够在体外显著抑制人乳腺癌细胞Bcap-37和肝癌细胞BEL-7402的增殖，且该作用具有显著的剂量依赖效应。 为了深入评价STT体外抗肿瘤作用的效果，采用MTT法进行了STT对正常肝细胞和肝癌细胞抑制作用的比较实验并观察了其与盐酸阿霉素对肿瘤细胞的协同抑制效应，结果显示：STY对于正常肝细胞LO2的抑制效应要小于肝癌细胞BEL-7402；高浓度的STT与盐酸阿霉素对于抑制肿瘤细胞具有协同效应，但在低浓度时表现为拮抗效应。 采用wright染色法、丫啶橙染色法和透射电子显微镜进行形态学观察发现：两种癌细胞经STT作用后，均可见核固缩、染色质边集以及出芽的凋亡细胞；碘化丙啶(PI)染色的流式细胞术法检测了STT对Bcap-37和BEL-7402细胞周期的影响，应用免疫荧光与流式细胞术结合法检测STT对BEL-7402细胞的抗细胞凋亡蛋白Bcl-2含量以Bcap-37细胞的细胞周期蛋白cyclin D1和cyclin E水平的影响，结果表明：STT能够促进大量BEL-7402细胞的凋亡，但未见细胞周期阻滞效应，STT诱导Bcap-37细胞的凋亡率较低，却可将Bcap-37细胞周期阻滞在G0／G1期。而且STT能够降低BEL-7402细胞的抗凋亡蛋白Bcl-2表达，并能够降低Bcap-37细胞的细胞周期蛋白cyclin D1和cyclin E水平。 采用活性氧(ROS)检测试剂盒观察发现STT可提高Bcap-37细胞内活性氧的含量，促发细胞的氧化损伤，但对BEL-7402细胞无显著影响，该项研究结果显示：促发活性氧所诱导的氧化损伤也是STT抑制Bcap-37细胞增殖效应的机制之一。 综上所述：STT可抑制人乳腺癌细胞Bcap-37和人肝癌细胞BEL-7402的增殖，对人正常肝细胞的具有较低的抑制效应，高浓度的STT与ADM对Bcap-37和BEL-7402细胞具有协同抑制效应，STT抑制Bcap-37细胞增殖的主要机理摘要有:降低cyclinE和cyclin Dl水平诱导细胞周期阻滞以及促进细胞凋亡和诱发氧化损伤，而STT对肝癌细胞BEL一7402抑制效应的主要机理之一是通过下调BCL一2蛋白表达诱导肝癌细胞凋亡。 本文的第二大板块是上海市西部开发科技合作项目(编号014358009)子课题的一项内容，继前一板块完成羡黎皂普对肿瘤细胞作用影响的基础上，为了解沙棘籽渣黄酮的生物学活性，研究从天然产物化学的提取，分离纯化的现代技术切入，并对有效成分的生药学原理采用离体肿瘤细胞和基因芯片等技术进行了后续研究。 研究首先采用0.8 mol几的盐酸80℃水解lh作为水解条件，酸水解法处理沙棘籽渣中提取的黄酮昔。其后以甲醇一水(60:40)为流动相，紫外检测器的检测波长为368nxn，流速为1 .0 ml/ min作为色谱条件，用HPLC测定黄酮昔元含量。结果显示:每1009沙棘籽渣样品中棚皮素、山奈素、异鼠李素的含量分别为18.58 mg，122.50 mg，27.64 mg;而回收率分别为99.47%，103.700，0，95.51%。 在此基础上，采用黄酮纯度和得率为指标比较了传统的化学纯化法与聚酞胺柱层析法，进而对沙棘籽渣黄酮的提取和分离纯化工艺作了研究:结果发现两种方法所得黄酮纯度相当(50一55%)，但聚酞胺柱层析后黄酮得率(24%)大大高于化学纯化法，后者的工艺的优势明显优于前者。 分离纯化工艺研究结果不仅有助于中药的现代化，同时奠定了探索生物学活性的后续试验基础。 离体细胞试验首先采用了MTT法测定FsH对乳腺癌细胞Bc即一37的生长抑制作用，发现，200一1 000 09/ml的FSH能显著抑制BcaP一37的增殖生长，且随浓度的升高，抑制作用增强，具有一定的剂量依赖关系。为了探讨FsH对BcaP一37细胞的生长抑制作用的机理，采用Wright染色法和Tu呵EL法观察FSH对Bcap一37细胞的致凋亡作用;采用PI染色的流式细胞术法检测凋亡率和细胞周期变化，结果表明:FSH能够诱导Bcap一37细胞的凋亡，凋亡率最高达到2.63%，并对Bcap一37细胞具有GZ舰期阻滞效应。 为了探讨FSH对Bcap一37细胞生长抑制作用的分子水平的机制，采用基因芯片检测技术检测了细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡相关基因的表达，发现FSH能够下调Bcap一37细胞内细胞周期蛋白依赖激酶1(C DKI)、DNA复制相关基因摘要 (DNA聚合酶Q、拓扑异构酶H、PCNA)以及c一myc、C一fos等癌基因的表达;而能够上调caspaseg、BAKI，FADD以及MADD等促凋亡基因的表达:FsH抑制Bcap一37细胞增殖分子机理主要是通过调控相关基因表达阻滞细胞周期，抑制细胞DNA复制以及抑制癌基因所启动的DNA复制及转录，并能通过增强Bc即一37细胞的凋亡敏感性间接促进细胞凋亡。 由于活性氧在细胞增殖、死亡中所起的重要作用，继而研究了FSH对BcaP一37细胞内活性氧水平的影响，发现FSH能显著增加Bcap一37细胞内RoS水平，表明FSH能通过促进细胞氧化损伤抑制Bcap一37癌细胞的增殖。 此外，研究还就FSH对人肝癌BEL一74