基于金磁微粒的心肌钙蛋白I免疫层析检测方法的建立

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心血管疾病在全球范围呈极高的发病率,而急性心肌梗死是导致死亡的主要原因之一,故对急性心肌梗死进行预防和诊断显得尤为重要。心肌肌钙蛋白I (Cardiac troponin I, cTnI)是心肌肌钙蛋白的三亚基之一。在急性心肌梗死的早期,cTnI释放量增加,具有很高的特异性,是心肌梗死诊断的理想标志物。选用GoldMagr金磁微粒为载体,以PSS对其进行修饰后固定相应的抗cTnI单克隆抗体,搭建免疫层析系统,以实现对cTnI的快速定性或定量检测。结果表明,GoldMag(?)-CS30nm金磁微粒经PSS修饰后,其粒径为66.81±0.54nm,平均电势为-34.83±0.62mV,保证了很好的单分散和胶态稳定性。对不同批次修饰后,金磁微粒粒径和电位的表征结果分析其变异系数分别为7%、9%,保持修饰方法的稳定性。修饰后的GoldMag(?)-金磁微粒用作免疫层析标记材料,每mg金磁微粒可偶联155.8μg的抗cTnI单克隆抗体,平均粒径为124.56±0.71nm,偶联率达77.9%。将此“金磁微粒-抗体”复合物用于免疫层析定量检测人血清中cTnI浓度,最低检测限可达0.90ng/ml;磁信号定量检测范围为0-5.29ng/ml,呈良好的线性关系,体系评价实验证明该检测系统具有高的灵敏度、特异性和稳定性。
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