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目的:已有研究发现,Rottlerin(咖马林)能够抑制肿瘤的发生发展过程。然而,Rottlerin在发挥抗肿瘤活性时,其具体的分子机制仍旧不够十分清楚。目前研究已经证实,Skp2(S期激酶相关蛋白2)在多种人类恶性肿瘤中发挥癌基因作用。因此,抑制Skp2的活性极有希望能够用于治疗人类癌症。方法:1.采用CTG检测法和集落形成实验检测乳腺癌细胞在Rottlerin处理后的增殖情况,以及在Skp2过表达和沉默后细胞生长情况;2.用流式细胞分析检测在Rottlerin处理和Skp2蛋白表达改变后,乳腺癌细胞的凋亡和周期变化;3.通过划痕愈合实验和侵袭实验,检测细胞被Rottlerin处理后的迁移和侵袭能力;4.用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时定量PCR(q-PCR)检测乳腺癌细胞在Rottlerin处理后mRNA的变化;5.Western blot实验检测乳腺癌细胞在Rottlerin处理和Skp2过表达和沉默处理后蛋白表达量的变化;6转染Skp2质粒或siRNA,调控细胞中Skp2的表达量,从而研究Skp2在细胞中发挥功能的分子机制。结果:结果显示,Rottlerin能抑制乳腺癌细胞生长,诱导细胞凋亡并且将细胞周期阻滞在G1期。同时,我们还发现了Rottlerin能抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭。在分子机制研究中,我们发现Rottlerin从mRNA水平和蛋白水平下调了乳腺癌细胞中的Skp2表达水平。结论:Skp2过表达能减弱Rottlerin介导的抗肿瘤活性,而下调Skp2蛋白则能增强Rottlerin诱导的抗肿瘤功能。因此我们确定Rottlerin具有抗肿瘤潜能,其抗肿瘤功能的部分原因是因为Rottlerin能抑制乳腺癌细胞中的Skp2的活性。我们的研究结果表明,在乳腺癌治疗中,Rottlerin可能是一个安全高效的天然药物。