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研究背景及目的在严重烧伤后早期,微血管扩张,血管通透性增加,大量水分及营养物质丢失,炎症介质入侵,严重可引起休克及多脏器损伤,而肺脏是最常损伤的器官。烧伤后引起急性肺损伤(ALI)可能机制如下:1.中性粒细胞作为ALI发病过程中最为重要的细胞,通过释放活性氧、多种细胞因子及蛋白水解酶引起肺损伤;2.氧化与抗氧化反应的严重失衡可能是ALI发生的机制;3.ALI患者凝血因子发生异常,继而导致凝血与抗凝机制作用异常,造成肺泡内纤维蛋白沉积;4.肺毛细血管内皮细胞的损伤是ALI发病过程中的中心环节,肺微血管通透性增加是早期肺损伤的重要原因。粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)是一种具有多种功能的细胞因子,其与GM-CSF受体(GMR)结合促进多种细胞的增殖和分化,保护并提高多类细胞的功能,包括内皮细胞、成纤维细胞、中性粒细胞/单核细胞、树突状细胞及角质形成细胞等。在过去,GM-CSF主要应用于放化疗及骨髓移植后的白细胞减少症、再生障碍性贫血等免疫缺陷性疾病的治疗,发挥抗肿瘤及抗感染作用;现在GM-CSF还可以应用到各类创面的修复,通过加速伤口上皮化、参与新生血管的形成及伤口的收缩以促进伤口愈合;近年来,我们的研究还发现GM-CSF可以调节血管周细胞增加Ang-1的表达,降低VEGF的表达,从而调节微血管通透性,促进伤口愈合。综合以上研究基础,我们设想GM-CSF可能对严重烧伤后的急性肺损伤具有保护作用。本课题在严重烧伤急性肺损伤模型的基础上,腹腔注射GM-CSF,观察GM-CSF对烧伤后急性肺损伤治疗效果,并分析其可能的机理。方法SD大鼠30只随机分为A、B、C三组,A组为假烫组,其余制模成30%Ⅲ度烧伤,B为立即复苏用药组,C为立即复苏不用药组,(复苏液为乳酸林格氏液,按照Parkland公式;GMCSF用药方法60ug/kg,腹腔内注射)各组大鼠均于伤后48h后取外周血,用ELIAS方法检测MPO、TNFa、IL-6,VEGF、ANG-1;取肺组织检测肺组织湿干比并做病理检测,用免疫荧光法,检测肺组织MPO、IL-6、VEGF及ANG-1表达情况。上述结果均用t检验做统计学分析。结果1.大鼠烧伤48h后,各组肺组织湿干比均较A组(4.3502±0.0782)明显增加。其中B组湿干比(4.5834±0.1030)低于C组(4.8509±0.1896),比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。2.烧伤48h后检测各组肺组织MPO浓度含量情况:C组(144.6±6.1325pg/ml)明显高于B(97.7±4.7603)组,差异有统计学意义(P<0.01);A组(68.1±5.7227)略低于B组(97.7±4.7603),差异有统计学意义(P<0.05)。3.在建立模型48h后取外周血测得TNF-a、IL-6、VEGF浓度含量:C组(237±18.69pg/ml、124.8±10.8pg/ml、255.7±12.48pg/ml)较A组(135.2±13.17pg/ml、74.5±12.5pg/ml、152.3±8.86pg/ml)及B组(170.2±14.96pg/ml、88.6±8.2pg/ml、179.3±11.2pg/ml)显著升高,C组明显高于B组(P<0.01),差异有统计学意义。而外周血中B组(3080±218.27pg/ml)ANG-1浓度含量较C组(2045±98.69pg/ml)显著增高,差异有统计学意义(P<0.01),而A组与B组无明显差异,无统计学意义。4.烧伤48h后肺组织中检测TNF-a及IL-6的浓度含量C组较A组及B组明显增加,C组(214.8±8.24pg/ml、116.1±6.0pg/ml)明显高于B组(177.4±3.78pg/ml、82.1±5.27pg/ml),比较差异有统计学意义(P<0.01)。C组肺组织中VEGF浓度含量(279.3±8.07pg/ml)明显高于及B组(177.4±3.78pg/ml),差异有统计学意义(P<0.01);B组ang-1浓度含量(3106±80.2pg/ml)明显高于C组(2177±93.56pg/ml)(P<0.01),差异有统计学意义。5.烧伤48h后对肺组织中的血管通透性指标进行荧光分析检测,观察到C组组中IL-6、MPO及VEGF表达含量较A组与B组明显增多,而ang-1荧光表达A组与B组明显强于C组。6.烧伤48h后C组Evans Blue OD值(0.318±0.337)明显高于B组(0.202±0.397),差异有统计学意义(P<0.01)。结论1.大鼠严重烧伤后早期,肺组织水肿为早期并发症,通过腹腔注射GM-CSF用药发现可以减轻肺水肿,提示GM-CSF对严重烫伤后急性肺损伤有保护作用。2.GM-CSF通过促进血管外周细胞ANG-1的表达,降低VEGF作用于血管内皮细胞通透性,增强细胞与细胞之间的紧密性,减少水分及大分子物质的渗出,降低肺毛细血管通透性,对肺部具有保护作用。