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利用病毒本身的基因获得抗病毒转基因植株,即源于病原物的抗病性（pathogen-derived resistance ,PDR）,已经成为植物抗病毒基因工程育种的主要措施之一。其中包括外壳蛋白（CP）基因、运动蛋白（MP）基因、复制酶基因以及病毒卫星RNA 基因等多种策略。1993 年Lindbo 等又发现了RNA 介导的病毒抗性,这种策略具有抗病程度高、抗性持久、生物安全性高等特点,因此是一种具有较大潜在应用价值的植物抗病毒基因工程策略。PVX 是马铃薯X 病毒属的典型成员,常与其他病毒混合侵染往往导致马铃薯的毁灭性减产。目前,利用RNA介导的病毒抗性对PVX的研究极少。RNA 介导的病毒抗性实际上是一种转录后基因沉默（posttranscriptional gene silencing,PTGS）。25KD 运动蛋白便是一种PTGS 的病毒抑制子。本研究以烟草为材料转化非翻译PVX-p25,通过沉默这种病毒抑制子来获得RNA 水平上的高度抗性的转基因植株。并同时转非翻译的CP 基因,探索二者的转基因植株抗病性是否有差异,为选择更有效的基因片段转化植物,获得高抗性比例的高度抗病的转基因植株奠定基础。具体结果如下:1. 分别克隆非翻译的PVX 25KD 运动蛋白基因与非翻译的PVX CP基因,构建植物双元表达载体pROKII-p25 和pROKII–CP。2.将植物表达载体pROKII-p25 和pROKII-CP 利用冻融法直接导入农杆菌LBA4404。PCR 及酶切鉴定证明质粒均已成功导入农杆菌菌株,可用于烟草转化。3.叶盘法转化烟草NC89。经卡那霉素对再生植株再次抗性筛选、PCR检测,表明共获得转非翻译PVX-p25 的植株78 株（T0 代）,转非翻译PVX-CP 的植株83 株（T0 代）。4. 转基因植株的抗病性分析:以PVX 的病汁液为接种物,汁液摩擦接种转基因烟草。症状观察及ELISA 检测表明不同的转基因植株对PVX的抗性比例存在着差异。在78 株转PVX-p25 的烟草中有31 株表现高度抗病,抗性比例为39.7%。在83 株转PVX-CP 的烟草中有11 株表现高度抗病,抗性比例为13.3%。5.分别选取抗病性表现不同（抗病和感病）的部分转基因植株提取总