FANCI在肝细胞癌组织中表达及对肝癌细胞增殖、凋亡、侵袭影响的研究

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目的肝癌在我国的发病率和死亡率位列前茅。随着影像学不断的发展,肝癌的早期诊断率也越来越高,外科根治性切除仍然是治疗的金标准,但是仍有大量肝癌患者发现时已是晚期,因此,寻找早期肝癌诊断的生物标记物是我们目前研究的难题。目前为止,还没有研究探索FANCI在肝细胞癌发生、发展中的机制作用,本研究旨在了解FANCI的功能失常是否参与肝细胞癌的发病过程;FANCI如何影响肝细胞癌的增殖、迁移、侵袭,为FANCI成为肝细胞癌诊断的标记物和治疗新靶点奠定实验基础。实验方法我们使用了q RT-PCR法确定了FANCI在HCC样本和细胞系中的表达水平,结合随访数据和TCGA数据库进行分析和预后的关系。体外功能实验我们制备了si-FANCI瞬转Hep3b细胞和Huh7细胞后,利用CCK-8测定法和集落形成实验测定基因与细胞增殖关系;使用Transwell测定法评估细胞迁移和侵袭;利用流式细胞数检测肿瘤细胞凋亡;通过免疫组化和蛋白印迹法鉴定FANCI蛋白在组织中含量。最后,体内功能实验通过裸鼠皮下成瘤异物种植实验验证了FANCI和肿瘤生长大小的关系。结果我们的结果表明,q RT-PCR检测显示FANCI在HCC中组织和细胞系中表达明显上调,与HCC的恶性特征和不良预后密切相关,并与肿瘤大小有关。随后的实验表明,敲低FANCI后在体内外均能抑制HCC细胞的生长。生存分析表明,HCC患者FANCI的高表达导致更差的预后。结论在本研究中,我们的实验数据表明FANCI是早期HCC诊断良好的有效指标,敲低的FANCI通过抑制肝癌细胞增殖从而提高患者预后。由此可见,FANCI具有应用于临床肝癌靶向治疗的潜在价值。
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