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目的:本研究以c-JUN氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)为切入点,研究JNK在脑缺血耐受诱导中的作用,并观察疏血通脉胶囊预处理对其的调控作用,探讨疏血通脉胶囊预处理所诱导的内源性神经元保护机制及作用靶点,阐述中医学对缺血性脑卒中未病先防的“治未病”理论的科学内涵。 方法:雄性SD大鼠96只,随机分假手术组、缺血再灌组、预缺血组、疏血通脉组,每组24只,每组大鼠于术后3h、6h、24h、72h四个时间点分为4个亚组,每亚组6只大鼠。预缺血组对大鼠进行3分钟脑缺血预处理,诱导大鼠产生脑缺血耐受,24小时后建立大鼠脑缺血再灌注模型,缺血再灌组和疏血通脉组不予预处理,直接建立大鼠脑缺血再灌注模型。应用免疫印迹法观察 JNK、磷酸化的 c-JUN氨基末端激酶(phosphorylation c-Jun N-terminal kinase,P-JNK)在大鼠脑缺血预处理模型中的表达情况,并与假手术组、脑缺血再灌注组、疏血通脉胶囊组的表达水平进行比较,应用Tunel法检测神经元细胞凋亡数量,观察JNK、P-JNK的表达水平与神经元细胞凋亡的相关性。 结果:缺血再灌组、预缺血组、疏血通脉组 P-JNK表达水平从3h时均开始出现上调,并逐渐增高,并于24h达到高峰,各时间点与假手术组相比均具有统计学差异(P<0.05),提示脑缺血再灌注后JNK通路激活(表现为P-JNK表达水平上升,P-JNK/JNK比值增高),各时间点预缺血组与疏血通脉组比较无统计学差异(P>0.05),预缺血组、疏血通脉组各时间点 P-JNK/JNK均低于缺血再灌注组,差异均有统计学意义(P<0.05),提示缺血预处理及疏血通脉胶囊可抑制JNK的激活。各时间点随机视野观察中,假手术组偶见极少量凋亡细胞,且无神经功能缺损,缺血再灌组、预缺血组、疏血通脉组随着脑缺血再灌注时间的延长,凋亡数量逐渐增加,并于24h时达到高峰,预缺血组与疏血通脉组各时间点细胞凋亡数量均较模型组少,差异具有统计学意义(P<0.05)。 结论:(1)脑缺血预处理能够减少脑缺血再灌注后神经元细胞的凋亡,改善神经功能。(2)脑缺血预处理机制可能与JNK抑制有关。(3)疏血通脉胶囊预处理可能通过抑制JNK起到脑保护作用。