酶法制取比目鱼皮胶原寡肽及其功能性的研究

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以低值鱼类或水产加工的废弃物为原料,生产具有各种生理功能的活性肽,不但可以充分利用渔业资源,而且能够开发低成本高附加值的产品。 本文以比目鱼皮为原料,通过蛋白酶水解的方法来制取具有生理活性的胶原寡肽。首先对新鲜的鱼皮进行预处理,然后利用单因素试验和响应面分析优化酶法制取比目鱼皮胶原寡肽的最佳工艺条件,并且利用凝胶过滤层析法和飞行时间质谱法对所得胶原寡肽的分子量分布进行了测定。 在本文中也对该胶原寡肽的功能性进行了初步的研究:利用称量法测定了其吸湿和保湿性能;以酪氨酸为底物,在酪氨酸酶的催化作用下,通过其对黑色素生成量的抑制情况测定了该寡肽对酪氨酸酶的抑制活性;利用紫外分光光度法测定了其对血管紧张素转化酶(ACE)的体外抑制活性;而且还通过对小鼠皮肤涂抹该胶原寡肽的方法测定了它对皮肤胶原合成的促进功能。 对比目鱼皮的预处理试验结果表明:在4℃条件下用0.2%的柠檬酸溶液对比目鱼皮的溶胀效果最好。单因素试验和响应面分析优化酶法制取比目鱼皮胶原寡肽的最佳工艺条件为:pH10;底物质量浓度70g/L;温度55℃;加酶量4%;水解时间2h;最大水解度为22.36%。分子量测定结果表明所得胶原寡肽的分子量主要集中在0.6~1.8KD之间,属于寡肽。功能性试验表明与常规保湿剂甘油和壳聚糖相比较,该胶原寡肽具有较好的吸湿性和保湿性,可以作为一种皮肤保湿剂。同时它对酪氨酸酶也有一定的抑制活性,可以抑制黑色素的形成。它具有抑制血管紧张素转化酶(ACE)的活性,起到降血压的作用,其半抑制浓度为1.65mg/ml。涂抹和投食的小鼠动物实验都表明该胶原寡肽还能促进皮肤胶原的合成,涂抹剂量为5%时,有明显效果(P<0.01)。
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