【摘 要】
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松茸是一种珍贵的食药两用真菌,其多糖具有抗肿瘤、抗衰老、改善免疫系统功能等功效。本文对松茸菌株的液体深层发酵工艺及其多糖的提取方法、理化性质、免疫活性进行了初步
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松茸是一种珍贵的食药两用真菌,其多糖具有抗肿瘤、抗衰老、改善免疫系统功能等功效。本文对松茸菌株的液体深层发酵工艺及其多糖的提取方法、理化性质、免疫活性进行了初步的研究,为松茸发酵产品的开发奠定了基础。以获取较高菌丝生物量和胞外多糖为目的,通过正交试验,确定松茸的最适液体发酵培养基组成为:葡萄糖4%,大豆蛋白胨4%,酵母粉0.2%, MgSO4·7H2O0.15%, KH2PO40.3%。在摇瓶培养条件下研究pH值、装液量、接种量、培养温度、摇床转速等因素对生物量及胞外多糖的影响。结果表明最适的摇瓶培养条件为:起始pH值6.0、装液量100mL/250mL、接种量8%、培养温度25℃、摇床转速170r/min,发酵周期为6d。在摇瓶培养实验的基础上,进行发酵罐放大实验,结果表明:利用10L发酵罐,在通气量(V/V)为1:0.8,搅拌速度200r/min,温度25±1℃,装液量为7L的条件下,菌丝生物量达到39.1g/L。松茸胞外多糖提取的最佳工艺路线为:将离心去除菌丝体的发酵液pH调至6.0,60℃浓缩至原体积的1/2,冷却后加入预冷的3倍体积的95%乙醇,放置于4℃冰箱至少24h,3500r/min离心收集沉淀,沉淀经无水乙醇反复洗涤,得胞外粗多糖。超声波法提取松茸菌丝体多糖的最佳工艺为:料液比1:30,超声波功率400W,超声波破壁时间30min,水浸提温度90℃。通过动物实验表明:松茸未去蛋白的胞外多糖与未去蛋白的胞内多糖能够显著增强巨噬细胞的吞噬功能,对脾淋巴细胞的增殖有促进作用,而未去蛋白的胞外多糖及去蛋白的胞外多糖有使抗体升高的作用。
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