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目的研究和厚朴酚(Honokiol,HNK)在体外及体内实验中治疗膀胱癌的作用及其分子机制。方法体外实验中,以不同浓度的HNK分别处理T24和5637膀胱癌细胞,通过细胞生存实验观察膀胱癌细胞的生长情况：克隆形成实验观察肿瘤细胞的增殖能力；划痕修复实验观察肿瘤细胞的迁移能力；Transwell小室重建基底膜侵袭实验观察肿瘤细胞的侵袭能力；流式细胞术检测细胞周期分布；通过Hoechst33342染色后荧光显微镜下观察细胞及细胞核形态。提取经不同浓度HNK处理的T24和5637膀胱癌细胞总蛋白质,应用蛋白质免疫印迹检测法(Western blot)观察细胞周期调节蛋白、凋亡调节蛋白及其潜在机制的蛋白表达情况。体内实验通过建立T24膀胱癌细胞裸鼠异种移植瘤模型,观察不同浓度HNK对肿瘤生长的作用及药物的毒副作用。通过组织切片HE染色法观察HNK对T24膀胱癌皮下移植瘤病理学形态的影响。免疫组化染色法检测HNK对肿瘤干细胞标志蛋白CD44及肿瘤增殖标志蛋白Ki67表达的影响。Western blot法观察HNK对肿瘤转移蛋白MMP9,肿瘤干细胞标志蛋白Notch-1,Sox-2,CD44,EZH2及其靶蛋白H3K27me3表达的影响。结果体外实验中,细胞生存实验显示HNK对T24和5637膀胱癌细胞的生长抑制作用呈剂量依赖性,在不同浓度HNK (0μg/ml、4.8μg/ml、7.2μg/ml、9.6μg/ml、9.6μg/ml、19.2μg/ml浓度HNK治疗后的表达量逐渐下降,凋亡蛋白PARP的表达亦逐渐下降,并在19.2μg/ml的高浓度药物组出现标志凋亡的剪切带。而细胞周期抑制蛋白p21、p27、促凋亡蛋白BAX在4.8μg/ml、9.6μg/ml、19.2μg/ml浓度HNK治疗后表达量逐渐增加。同时,肿瘤转移蛋白MMP9和肿瘤干细胞标志蛋白CD44、Notch-1、Sox-2、EZH2及其靶蛋白H3K27me3的表达量逐渐下降。体内实验中,与对照组相比,HNK可明显抑制T24荷瘤裸鼠皮下移植瘤在体内的生长,同时未见明显毒副作用。对照组、40mg/kg HNK治疗组和80mg/kg HNK治疗组在第5周时肿瘤的体积分别为：1240.95±2.396mm3、529.875±3.402mm3、244.663±1.243mm3;肿瘤重量分别为：0.885±0.232g、0.471±0.383g、0.255±0.174g；肝脏重量分别为：2.164±0.352g、1.750±0.228g、1.839±0.286g；脾脏重量分别为：0.717±0.218g、0.574±0.204g、0.475±0.136g；双肾重量分别为：0.551±0.082g、0.543±0.126g、0.486±0.067g；体重分别为：28.53±0.96g、29.36±3.25g、27.38±3.07g。取T24膀胱癌皮下移植瘤常规组织切片HE染色镜检,移植瘤细胞形状不规则,大小不一,核大,浓染,核异形明显,可见病理性核分裂相,核质比例明显增大,80mg/kg HNK治疗组膀胱癌细胞出现不同程度的退变,核质比例有所减少。免疫组化染色结果显示,80mg/kg HNK治疗组肿瘤组织的CD44和Ki67蛋白表达量较对照组明显减少。与体外实验结果一致,80mg/kg HNK治疗组肿瘤组织的转移蛋白MMP9和肿瘤干细胞标志蛋白CD44、Notch-1、Sox-2、EZH2及其靶蛋白H3K27me3的表达量较对照组明显下降。结论HNK体外及体内通过抑制膀胱肿瘤干细胞功能以达到抑制肿瘤生长、增殖及转移,促使细胞周期停滞在G1期并诱导细胞凋亡。