【摘 要】
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【目的】探讨miR-4313在肾细胞癌恶性转化过程中的生物学功能,并探究其作用机制,为肾细胞癌的分子靶向治疗提供新思路和新方法。【方法】第一部分:1、通过实时荧光定量PCR检
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【目的】探讨miR-4313在肾细胞癌恶性转化过程中的生物学功能,并探究其作用机制,为肾细胞癌的分子靶向治疗提供新思路和新方法。【方法】第一部分:1、通过实时荧光定量PCR检测肾癌组织中miR-324-3p和miR-4313的表达水平。2、利用microRNA模拟物瞬时转染786-O和OS-RC-2肾癌细胞,采用MTT法检测转染后各细胞的增殖能力。3、划痕实验检测转染后各细胞的迁移能力。4、Transwell实验检测转染后各细胞的侵袭能力。第二部分:1、通过microRNA靶基因预测软件预测miR-4313的候选靶基因。2、采用实时荧光定量PCR检测转染不同浓度mi R-4313模拟物后786-O肾癌细胞中候选靶基因mRNA表达情况。【结果】第一部分:1、miR-324-3P和miR-4313的表达水平均较正常组织显著降低。2、转染miR-324-3p和miR-4313模拟物后,细胞增殖能力都发生减弱。但mi R-4313模拟物对细胞增殖能力抑制更强。3、转染miR-324-3p和miR-4313模拟物后,细胞的迁移和侵袭能力没有改变。第二部分:1、通过microRNA靶基因预测软件确认miR-4313的候选靶基因为UCP4、CUX1、MBD6和TBX15。2、随着miR-4313模拟物转染浓度的升高,候选靶基因TBX15 mRNA水平逐渐下降,而其余三个候选靶基因mRNA水平没有改变。【结论】在肾细胞癌恶性转化过程中,miR-4313表达发生减少,导致其对靶基因TBX15抑制调控能力减弱,靶基因TBX15表达水平上升,肾癌细胞发生无限制的增殖,从而肾细胞癌获得更强的恶性表型,最终促使肾细胞癌的演进和恶性转化。本实验初步探讨了肾细胞癌演进的分子机制,旨在为肿瘤的分子靶向治疗提供新思路和新方法。
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