前言 胃癌的发生发展是一个多因素、多步骤的过程,涉及到多方面机制。肿瘤抑制基因PTEN具有双特异性磷酸酶活性,通过诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡等抑制肿瘤发生发展,并能多途径地抑制肿瘤浸润和转移。细胞外基质和基底膜降解是恶性肿瘤浸润和转移的关键环节,MMP-9可特异性地降解其中的Ⅳ型胶原。细胞凋亡功能的抑制将导致肿瘤的发生及免疫功能的异常,Caspase-3是人类细胞凋亡的关键蛋白酶。本文通过对胃癌组织中PTEN、MMP-9、Caspase-3表达的研究,来探讨它们在胃癌的发生、发展、浸润和转移中的作用。 实验材料 1.研究对象:选择临床及病理资料齐全的存档胃腺癌蜡块标本54例,按各临床病理因素分组。另取正常胃粘膜标本15例作对照。 2.主要试剂与器材:浓缩型PTEN鼠抗人单克隆抗体,MMP-9兔抗人单克隆抗体,Caspase-3鼠抗人单克隆抗体,浓度分别为1:75、1:100、1:200。S-P试剂盒及DAB显色试剂盒。免疫组织化学染色所需的常规试剂与仪器。 实验方法 将蜡块切片HE染色,确定标本的组织分化程度。采用SP免疫组化方法检测PTEN、MMP-9、Caspase-3在胃癌及正常胃组织中的表达。以细胞内出现明显棕黄色颗粒为阳性细胞,按其占同类记数细胞的百分比计数三种蛋白染色结果。所得数据采用X~2检验和相关分析作统计学分析,P<0.05为差异显著标准。