基因重组人生长激素联合褪黑素修复兔胫骨骨缺损的成骨效果研究

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目的:观察基因重组人生长激素(recombinant human growth hormone,rhGH)联合褪黑素(melatonin,MT)在兔胫骨缺损修复过程中的成骨效果,明确两种药物联合使用在骨缺损修复中的作用。方法:取雄性新西兰大白兔24只(4~6月龄,2.5~3.0 kg)随机标号,于双侧胫骨制备直径5 mm,深度6 mm的骨缺损模型,1-12#左侧为rhGH–MT联合用药组,在胫骨缺损处局部植入含1IU rhGH和0.3mg MT的0.1ml自体血凝块,1-12#右侧为空白对照组,在胫骨缺损处局部植入0.1ml自体血凝块;13-24#左侧为MT组,在胫骨缺损处局部植入仅含0.3mg MT的0.1ml自体血凝块,13-24#右侧为rhGH组,在胫骨缺损处局部植入仅含1IU rhGH的0.1ml自体血凝块。分别于术后第1、2、4周进行骨缺损大体观察、X线影像学、组织学观察以及骨组织形态计量学的测定。结果:大体观察、X线影像学以及组织学观察到各组均有不同程度的新骨组织形成:术后第1周,rhGH–MT组术区缺损较其他3组小,炎症细胞较少,纤维结缔组织较多;rhGH组和MT组可见血管肉芽组织、炎性细胞及纤维结缔组织随机分布。术后第2周,rhGH–MT组术区呈一较小凹陷,投摄影密度高,可见大量纤维结缔组织,及较连续排列的骨小梁和活跃的成骨细胞;rhGH组和MT组术区缺损比空白组小,X线影像表现相似,骨小梁和成骨细胞较联合组的少。术后第4周,rhGH–MT组缺损区可见明显大量新生骨充填,质地较韧,探针不易刺入,有较平整的骨皮质桥连,骨和旧骨之间的界线清晰,骨小梁连续成片分布,成骨细胞数量减少;rhGH组和MT组手术区中央新生骨较联合组少,探针能探入,缺损边缘有低密度影,骨小梁连续成片分布但较复合组的数量少,成骨细胞数量减少。骨组织形态计量学分析术后第1、2、4周,rhGH–MT组新生成骨组织面积百分比值分别为39.02%±2.16%、44.68%±1.83%、55.10%±2.98%,rhGH组新生成骨组织面积百分比分别为32.08%±1.39%、36.78%±1.91%、45.45%±2.75%,MT组新生成骨组织面积百分比分别为32.16%±1.27%、36.96%±2.35%、46.63%±2.43%,空白组新生成骨组织面积百分比分别为28.05%±1.26%、30.25%±2.23%、36.40%±1.68%。rhGH–MT组在术后第1、2、4周时新生成骨组织面积比大于其他3组(P<0.05);纵向比较,除空白组外,其他3组在第1、2、4周之间新生成骨组织面积百分比的差异均存在统计学意义(P<0.05)。结论:局部应用基因重组人生长激素联合褪黑素可有效促进骨缺损区新生骨组织生成,且效果优于分别单独使用两种材料。
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