目的构建核糖核酸酶抑制因子(RI)基因siRNA干扰质粒,并检测其对人膀胱癌BIU-87细胞侵袭和转移的影响。方法设计并构建针对RI基因mRNA的2个特异性siRNA表达载体和1个无同源性的阴性对照载体,通过酶切和DNA测序鉴定载体,再转染BIU-87细胞,通过RT-PCR、western blot和免疫细胞化学检测干扰的有效性。观察细胞形态改变,细胞粘附实验、划痕实验和Transwell法测定细胞粘附、迁移和侵袭能力的变化,分析细胞中基质金属基质酶的表达,及用激光共聚焦显微镜观察细胞骨架微丝结构。结果酶切和测序鉴定质粒构建符合实验设计;转入特异性siRNA表达载体后RI蛋白的表达被显著抑制,对照组未发生显著改变;2个干扰实验组的细胞形态堆叠严重,细胞粘附显著降低,迁移和侵袭能力显著增加,基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9显著提高,细胞骨架微丝聚集,细胞伸展出片状伪足。结论已成功构建RI基因siRNA干扰质粒,抑制RI基因的表达后引起膀胱癌细胞的一系列特性改变,显著提高了膀胱癌细胞迁移和侵袭能力。结合之前的研究,上调RI表达能抑制肿瘤在体内转移,说明RI可作为抑制肿瘤侵袭和转移的有效靶点。