孕酮对原代培养仔兔交感节后神经元活性和Ca2+的影响

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tiger5156
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
孕激素(Progestin)是一种重要的性激素,雌性动物主要在卵巢合成,雄性动物在睾丸和肾上腺皮质合成,其生物学功能已在生殖功能范围内被广泛研究,可促进雌(女)性附性器官成熟及第二性征出现,并维持正常性欲及生殖功能。近年来,雌、孕激素与神经系统疾病的关系日益受到人们的重视。已有研究报道,孕激素可以对多种实验模型,比如模拟某些致病因素导致的脑功能障碍和与年龄相关的神经退行性疾病—阿尔茨海默氏病模型发挥神经保护作用,孕激素还可以保护原代培养的海马细胞免受硫酸亚铁和β-淀粉样蛋白的毒性影响。已有研究通过免疫组织化学SP法在雌性山羊交感神经节的腹腔肠系膜前神经节和肠系膜后神经节内的神经元中发现有孕激素受体的存在,提示交感神经节上的孕激素受体可能是孕激素对内脏器官内分泌调节和自主神经对其支配的相应内脏器官的神经调节之间相互协调作用的网络节点,但孕激素对交感节后神经元具体产生了什么样的作用目前尚不清楚。本研究采用免疫组织化学SP法检测仔兔及成年家兔颈前神经节内孕激素受体(PR)的分布特点;在神经元贴壁后添加不同浓度的孕酮,采用MTT法检测孕酮对培养的交感节后神经元活性的影响;用Ca2+荧光指示剂在激光共聚焦显微镜下动态监测培养神经元胞质内Ca2+浓度的变化,结果发现:1.运用免疫组织化学SP染色法,发现在仔兔及成年兔颈前神经节中孕激素受体主要在神经元内表达,提示颈前神经节具备接受孕激素调节的条件。2.初步建立了仔兔交感节后神经元的培养体系,经神经元特异性标记物(鼠抗人beta-tubulin Ⅲ)细胞免疫组织化学染色,神经元及突起均显示强阳性,证明仔兔交感节后神经元培养成功;经孕激素受体多克隆抗体细胞免疫组织化学染色,发现仔兔交感节后神经元呈强阳性表达,神经胶质细胞及突起呈弱阳性,提示仔兔交感节后神经元是孕激素作用的靶细胞。3.用三个浓度的孕酮处理交感节后神经元的培养体系,每隔6h检测其活性,发现所测三个浓度的孕酮作用6h后,实验组OD值与对照组相相比无显著性影响;作用12h后,20ng/mL组OD值显著高于对照组,而60ng/mL和100ng/mL组不存在显著性差异;18h后,三个实验组的OD值都显著低于对照组;24h后,100ng/mL组的OD值显著性低于对照组,其他两个浓度的则无显著性影响。提示20ng/mL的孕酮作用12h可增强交感节后神经元培养体系的活性,其他组则抑制其活性或无显著性影响。4.激光共聚焦显微镜下动态监测不同浓度孕酮处理后神经元胞质内Ca2+浓度变化,发现对照组对胞质内Ca2+浓度无显著性影响;20ng/mL和40ng/mL的孕酮可显著性增加胞质内Ca2+浓度,接着60ng/mL和80ng/mL的孕酮处理,胞质Ca2+浓度不再继续增加;在60ng/mL孕酮处理时,发现胞质内Ca2+浓度有个显著的瞬时升高,然后迅速回到原来水平。
其他文献
[目的]总结手术室与供应室一体化合作的体会。[方法]从观念转变、建筑设计、设备和人员配备、制度完善、工作流程等方面实施手术室与供应室一体化合作的管理模式。[结果]达到
本研究采用"学习—再认"的范式,招募58名大学生作为参与者,研究不同频次的面孔呈现方式,对不同性别参与者的面孔再认成绩的影响。实验结果发现:加工阶段多次呈现的面孔的再认
因社会体制的限制以及流动人口自身能力水平的制约,我国流动人口的婚姻时刻处在风险之中。为解决流动人口婚姻风险这个社会问题,在风险社会的理论框架下,首先分析了与流动人
城市化进程加速了新时期土地流转工作的有序进行,原本大批以种田为生的农民纷纷走出乡村,到发达城市经商、务工,以寻求更好的发展。以宿迁市沭阳县下属的3个乡镇为例,通过入
本文通过分析原设计的集中供暖系统在未改造前供暖系统存在的不足和问题,并且在实际的使用过程中,给锅炉设备带来的损坏情况和造成的危害。而且叙述了通过对供暖低压热水锅炉
干扰是从外部以及内部影响仪表以及相关装置正常工作的各种因素的综合,减轻和消除干扰是电测技术发展中的重点。本文主要从干扰的基本种类以及干扰的传递方式出发,结合电测技
[目的]探讨乳腺癌病人化疗过程中的静脉保护。[方法]对50例乳腺癌术后病人静脉输液过程全程监测,开始时建立化疗小组,进行专业培训,对病人进行健康教育;化疗过程中加强观察,
本文通过SWTO分析法,对贵州会展业发展的优势、劣势、机遇和面临的挑战进行了分析,提出了贵州会展业发展的策略。
经研究发现,土耳其留学生有时候使用汉语阅读策略。他们最常使用局部策略,其次是支持策略,最后是整体策略。在各项策略中,他们常常使用的策略是选择注意、重复、预览和利用声
随着现代信息系统与技术的迅猛发展,我国高校根据发展的需要,都在不同程度上实现了高校的信息化。为了给学生提供更好、更方便的学习条件,改善教职工和学生的教学工作、学习