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目的：甘油二酯激酶（diacylglycerol kinase, DGK）是一种重要的细胞内第二信使，参与多种细胞的生理病理反应。本研究利用大鼠实验性自身免疫性脑脊髓膜炎（experimentalautoimmune encephalomyelitis, EAE）模型，检测DGKα、β、γ在EAE不同病理阶段的脑干和脊髓的表达、细胞定位和分布变化，探讨DGKα、β、γ在EAE的作用机制，为临床治疗脱髓鞘疾病提供新思路。方法：应用豚鼠脊髓匀浆诱导Wistar大鼠EAE模型，用半定量RT-PCR检测脑干和脊髓DGKα、β、γmRNA的表达变化，用免疫组织化学法和免疫荧光双标法检测EAE发病过程中DGKα、β，PKC的细胞定位和分布变化。结果：1．EAE大鼠脑干内病理改变以炎性浸润为主，脊髓内病理改变以炎性浸润和脱髓鞘为主，脑干和脊髓内神经元均无明显的形态学改变。2．在脑干和脊髓中，病变各组DGKαmRNA的表达水平均低于正常组。DGKαmRNA的表达水平在1-2分组均下降，至3分组上升，但仍低于正常对照组的水平，至4分组，DGKαmRNA表达水平介于1-2分组和3分组之间。DGKβmRNA仅在4分组脑干和脊髓中的表达高于正常对照组，3分组脑干中DGKβmRNA的表达水平最低，脊髓中表达水平最低的是1-2分组。脑干中DGKγmRNA的表达水平在1-2分组降至最低，在3分组表达水平明显升高，超过正常组的水平，在4分组DGKγmRNA表达水平降至正常组与1-2分组之间；脊髓中DGKγmRNA的表达水平在各组间差异不明显。3．免疫组化染色显示，在正常组、1分和2分组的脑干中，DGKα阳性反应仅见于纤维状结构，DGKα阳性细胞首先出现于3分组，阳性反应分布在胞浆的核周部分。脊髓的白质和灰质中的纤维呈DGKα阳性反应。2分组脊髓前角的运动神经元呈DGKα弱阳性，至3分、4分组阳性反应强度略增。免疫荧光双标显示DGKα阳性细胞为神经元和少突胶质细胞。在正常组和EAE各发病组的脑干中，DGKβ阳性反应仅见于纤维状结构，未见DGKβ阳性细胞的出现。在正常组的脊髓中，仅白质和灰质内的纤维呈DGKβ阳性反应。在EAE大鼠脊髓中，DGKβ弱阳性细胞在1分、2分组出现，阳性表达位于细胞核；3分、4分组，DGKβ呈弱阳性表达于胞浆内。免疫荧光双标法显示，DGKβ阳性纤维表达为髓鞘阳性、神经元阴性。在正常组和EAE各发病组的脑干中，纤维状结构均呈PKC阳性反应。在EAE各发病组的脑干内，PKC阳性细胞出现于3分组，阳性反应位于胞浆内。在正常组和EAE各发病组的脊髓，阳性反应仅见于白质和灰质内的纤维状结构，灰质内未见PKC阳性细胞出现。免疫荧光双标法显示脑干内可见DGKα-PKC双阳性细胞和纤维。结论：1. EAE发病过程中脑干和脊髓中，DGKα、β、γ有不同的表达和分布。2. DGKαmRNA在3分组的表达升高提示3分时期可能是DGKα参与EAE病理变化的一个重要时期；DGKα在神经元细胞核和核周部分细胞浆的表达提示DGKα可能对粗面内质网或核糖体上甘油二酯的调节增强。3. DGKβmRNA在4分组的表达升高以及在运动神经元内表达转位提示4分时期可能是DGKβ参与EAE病理变化的一个重要时期，可能是DGKβ促进损伤后髓鞘清除的时期。4.脑干内PKC与DGKα阳性细胞和纤维共存，提示DGKα通过甘油二酯-PKC信号途径进行功能活动。