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喹诺酮类药物是一类人工合成的抗菌药物,因其具有抗菌谱广、杀菌力强、使用方便、价格低廉等优点而在兽医临床上被广泛应用。近年来,随着对该类药物应用的增加,滥用、不遵守休药期等现象日益增多,随之而来的残留问题也日益严重。我国农业部已规定了部分该类药物在动物性食品中的最高残留限量(MRLs)。本研究建立了25种喹诺酮类药物(包括吡哌酸、恩诺沙星、氧氟沙星、环丙沙星、马波沙星、培氟沙星、氟甲喹、二氟沙星、洛美沙星、帕珠沙星、达氟沙星、依诺沙星、氟罗沙星、诺氟沙星、西诺沙星、沙拉沙星、司帕沙星、噁喹酸、萘啶酸、莫西沙星、加替沙星、奥比沙星、那氟沙星、安妥沙星和巴洛沙星)在牛的可食性组织(包括肝脏、肾脏、肌肉、脂肪、牛奶)中的HPLC-MS/MS多残留检测方法,以期完善我国动物性食品中喹诺酮类药物的多残留检测方法。样品用1%甲酸乙腈-甲醇(95:5,V/V)溶液提取两次,合并两次提取的上清液,定容后充分混合均匀,移取2 m L提取液,用乙腈饱和的正己烷除去其中的脂溶性杂质,经氮气挥干,用1 m L 0.1%甲酸水-甲醇(95:5,V/V)溶解残渣,涡旋、超声后再经两次高速离心去除杂质,过0.22μm有机滤膜。用0.1%甲酸水-乙腈体系作为流动相,梯度洗脱,以Luna C18色谱柱进行分离,在正离子模式下用LC-MS/MS法进行分析检测。在本方法下,25种喹诺酮类药物的峰面积与浓度在线性范围内呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.99。同时,在低、中、高三个浓度水平做添加实验,所得平均回收率除安妥沙星在肾脏及肌肉中的较低(分别为51.9%~71.7%和56.2%~68.3%)外,其余回收率为62.7%~116.0%,批内变异系数为0.1%~14.4%,批间变异系数为1.0%~16.0%,满足痕量分析的要求。方法所得25种喹诺酮类药物的检测限(LOD)和定量限(LOQ)分别为:在牛肌肉、肝脏、肾脏组织中的LOD和LOQ分别是0.2~1.0μg/kg和0.5~2.0μg/kg;在牛脂肪组织中的LOD和LOQ分别是0.1~1.0μg/kg和0.5~2.0μg/kg;在牛奶中的LOD和LOQ分别是0.1~1.0μg/kg和0.2~2.0μg/kg。实验结果表明,本研究所建立的LC-MS/MS检测25种喹诺酮类药物的多残留检测方法操作简单、灵敏度高、重复性良好,符合兽药残留分析的要求。