AR与AR(CAG)n在乳腺癌中的表达及Bicalutamide拮抗AR靶向治疗的研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:candry
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目的:雄激素受体(androgen receptor, AR)表达和AR基因X染色体上CAG重复长度AR(CAG)n与乳腺癌发生发展密切相关。虽然不同性别乳腺癌与其健康对照人群的AR基因表型不同,但是在乳腺癌中缺乏对AR和CAG重复序列长度与临床病理因素以及预后的关联研究。本课题的目的是研究AR表达和CAG重复长度与临床病理因素关系,以及在预后中的价值。并通过体内外研究证实在乳腺癌中有较高表达的AR可以作为治疗的靶点,应用Bicalutamide(AR抑制剂)拮抗AR对乳腺癌有治疗作用。  方法:检测81例男乳癌和510例女乳癌AR表达情况和CAG重复序列长度。分析AR和(CAG)n与临床病理因素(年龄、肿块大小、分级、分期、淋巴结受累情况、ER、PR、Her-2、Ki-67、手术方式、化疗和内分泌等)和预后相关性。不同性别乳腺癌分别与80例健康男性人群和180例健康女性人群比较AR(CAG)n,分析癌症组与健康组的表达差异。应用MTT、克隆实验和线粒体膜电位检测给予Bicalutamide作用乳腺癌细胞MDA-MB-231和MDA-MB-453后在体外药物对细胞增殖和凋亡的影响。在体内检测应用Bicalutamide作用负荷MDA-MB-231和MDA-MB-453细胞模型鼠前后对肿瘤的抑制情况。  结果:实验结果显示在男乳癌中AR基因的长CAG重复序列(n≥21)比健康对照人群出现多,而在健康对照组中短CAG重复序列(n<21)出现较多(P=0.001)。在女乳癌中L/L型CAG重复序列(两条X染色体CAG重复序列n≥21)比健康对照人群表达多(P=0.002)。在男乳癌中长CAG重复序列与AR表达状态具有相关性(P=0.004);长CAG重复序列与AR阳性表达与短的5y-OS和5y-DFS相关(长CAG重复序列:P=0.050和P=0.035;AR阳性表达:P=0.048和P=0.029)。在女乳癌中AR表达与淋巴结受累情况(P=0.029)、ER(P<0.001)、PR(P<0.001)、Her-2(P=0.017)、Ki-67(P=0.020)、亚型(P<0.001)和L/L型CAG重复序列(P=0.036)具有相关性;L/L型CAG重复序列与月经状态(P=0.018)和组织学分级(P=0.038)具有相关性。AR阳性表达与女乳癌5y-OS和5y-DFS相关(5Y-OS为 P=0.001;5Y-DFS为P<0.001),AR阳性表达比AR阴性患者预后好。Bicalutamide作用MDA-MB-231和MDA-MB-453细胞前后MTT和克隆实验结果显示,按照10μmol/L药物作用肿瘤细胞后生长明显受抑制(P<0.05);克隆数减少(P<0.001),肿瘤细胞增殖受抑制。药物作用24小时后肿瘤细胞线粒体膜电位改变,凋亡增加P<0.001,促进肿瘤细胞凋亡。体内MDA-MB-231和MDA-MB-453细胞种植一侧乳腺负荷瘤裸鼠模型结果显示,Bicalutamide作用负荷瘤裸鼠后抑制肿瘤组织生长,使肿瘤体积缩小。  结论:AR基因CAG重复序列长度(n≥21)可作为预测乳腺癌风险的生物指标。在男乳癌中长CAG重复序列和AR表达与短生存时间相关,是不良预后指标。在女乳癌中AR阳性表达与较长的生存期相关,是较好的生存指标。体内外研究显示AR抑制剂Bicalutamide拮抗AR可以抑制肿瘤细胞生长和增殖,促进凋亡,并能抑制肿瘤组织生长使之体积较小。
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