泰妙菌素对动物源产气荚膜梭菌体外药效学及野生型折点的研究

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产气荚膜梭菌是一种革兰氏阳性杆菌,具有条件致病性,对人和动物的健康具有潜在威胁。泰妙菌素是一种动物专用抗生素,主要用于治疗支原体、螺旋体和革兰氏阳性菌引起的肺炎和肠道疾病等,在猪、家禽、家兔养殖业中较为常用。因此为了防止泰妙菌素滥用引起的细菌耐药性,对细菌进行耐药性监测是必要的。药敏试验需要野生型折点(COWT)作为判读标准,但目前国内外还没有泰妙菌素对产气荚膜梭菌的野生型折点的标准,本研究参考EUCAST和CLSI制定COWT的流程,以本实验室分离的产气荚膜梭菌为对象,分析了泰妙菌素对产气荚膜梭菌的COWT。本研究从陕西、甘肃、宁夏、青海四省区采集样品1908份,分离到产气荚膜梭菌334株,分离率为17.5%;以cpa、cpb、etx、ia毒素基因对分离的334株产气荚膜梭菌进行分型,其中A型产气荚膜梭菌308株,占比92.2%;D型产气荚膜梭菌26株,占比7.8%;未分离到B、C、E型产气荚膜梭菌。为了探究泰妙菌素对产气荚膜梭菌的体外药效,选取产气荚膜梭菌标准株ATCC13124作为受试菌株,进行泰妙菌素对其最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)、防突变浓度(MPC)、抗菌后效应(PAE)及体外杀菌曲线试验。结果显示其MIC为0.13μg/m L,质控范围为0.06~0.25μg/m L;MBC为2μg/m L,推断泰妙菌素属于抑菌型抗生素;MPC为108.8μg/m L,选择突变窗(MSW)范围较宽,为0.13~108.8μg/m L;体外杀菌效果和PAE都与药物浓度和作用时间呈正相关性。本研究进行了泰妙菌素对266株产气荚膜梭菌分离株的MIC测定,分析其MIC50为0.5μg/m L,MIC90为4μg/m L;绘制MIC分布直方图,结果显示266株产气荚膜梭菌的MIC在≤0.03~32μg/m L之间都有分布,且符合双峰正态分布,采用IBM SPSS Statistics 26和Ecoffinder对其MIC分布进行分析,最终分析推断了泰妙菌素对产气荚膜梭菌的野生型折点(COWT)为0.5μg/m L。本研究对西北四省区所采集样品进行了产气荚膜梭菌的分离和毒素分型,其结果可以作为产气荚膜梭菌病风险评估和流行病学调查的依据;泰妙菌素对产气荚膜梭菌的体外药效学的实验结果对临床用药具有指导作用;COWT的制定有利于药敏试验结果的判读、耐药菌株的筛选和临床折点的建立,也为临床用药提供了数据参考。
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