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目的研究miRNA-587在肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)中的表达水平及其与HCC临床资料、超声影像特征的关系;研究miRNA-587在肝癌细胞SMMC-7721中的生物功能作用及其潜在机制;研究miRNA-587的靶向作用基因RPSA在HCC中的表达水平及其与HCC临床资料、超声影像特征及预后的关系。方法第一部分1通过生物信息学方法和实时荧光定量PCR实验分别查找与验证miRNA-587在肝癌组织中的相对表达量;2统计分析miRNA-587在HCC癌组织和癌旁组织中的表达差异,及其表达水平与HCC患者的临床资料、超声影像特征的关系,计数资料采用卡方检验,计量资料采用t检验。第二部分1利用miRNA-587模拟物mimic和抑制剂inhibitor对肝癌细胞SMMC-7721进行转染,通过MTT增殖实验、克隆形成实验、划痕实验、Transwell侵袭实验、PI染色细胞周期实验与Annexin V-FITC/PI细胞凋亡实验等,检测miRNA-587对肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭、周期、凋亡等生物功能的影响。第三部分1通过生物信息学方法预测miRNA-587在HCC中靶向作用的mRNA,并且利用双荧光素酶实验进行验证;2基于生物信息学分析及临床收集的86对HCC癌组织与癌旁组织荧光定量PCR实验查找和验证miRNA-587的靶基因RPSA在HCC中的相对表达水平;3统计分析靶基因RPSA在癌组织和癌旁组织中的表达差异,及其表达水平与HCC患者的临床资料、超声影像特征的关系,计数资料采用卡方检验,计量资料采用t检验。;4通过Kaplan-Meier法绘制生存曲线,选用Log Rank统计学方法探究靶基因RPSA高表达组与低表达组HCC患者总生存率的差异;5用Cox比例风险回归模型进行单因素及多因素分析,研究靶基因RPSA表达水平、临床资料、超声影像特征与HCC患者预后的关系。结果第一部分1从生物信息学数据库GEO中下载两组肝癌芯片数据,分析显示miRNA-587在HCC癌组织较无癌组织为低表达(P<0.05)。利用qPCR实验检测分析临床HCC患者癌组织及其对应的癌旁组织,进一步发现miRNA-587在癌组织中高表达,这与生物信息学结果一致(P<0.05);2 miRNA-587与HCC患者临床基线资料及超声特征关系分析显示,miRNA-587表达的高低与甲胎蛋白(AFP)水平有关(P=0.001)。第二部分1 miRNA-587抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭能力(P<0.05);阻滞肝癌细胞周期于G0/G1期,抑制肝癌细胞向S期分裂增殖(P<0.05);对肝癌细胞的克隆形成、凋亡能力的影响无明显统计学差异(P>0.05)。第三部分1通过生物信息学分析及双荧光素酶实验结果证实,miRNA-587靶向调控RPSA基因的表达;2基于生物信息学分析及qPCR实验验证,发现靶基因RPSA在肝癌组织中较癌旁组织高表达(P<0.05);3在与HCC患者临床基线资料及超声影像特征的分析中发现,RPSA的表达高低与患者饮酒情况有关(P<0.05),饮酒可能为RPSA高表达的促进因素;4 RPSA表达水平与肝癌患者生存相关,RPSA高表达组较RPSA低表达组总生存率更低(P<0.05);5单因素分析发现,在HCC患者临床特征中影响预后的危险因素有BCLC分期和TNM分期(P<0.05);在超声影像特征中,影响HCC预后的危险因素有肿瘤最大直径、肿瘤数目及癌栓(P<0.05)。进一步多因素分析发现,肿瘤数目和癌栓是影响肝细胞癌预后的独立危险因素(P<0.05)。结论miRNA-587在HCC癌组织中相对癌旁组织呈低表达,其在HCC细胞中的作用机制可能为通过直接靶向调控RPSA从而抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭。靶基因RPSA在HCC癌组织中高表达,且与HCC患者预后显著相关。BCLC分期、TNM分期及超声测得肿瘤最大直径、肿瘤数目、癌栓是HCC的预后危险因素,其中超声测得肿瘤数目和癌栓是影响HCC预后的独立危险因素。miRNA-587在肝细胞癌中调控作用及机制研究,有望为肝癌的精准治疗提供新的治疗靶点。