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黄曲霉毒素（Aflatoxins,AF）是一种具有致癌作用的真菌毒素,在亚洲和非洲居民日常饮食中存在普遍污染的,包括AFB1和AFG1等不同亚型。研究证实其具有很强的致肝癌性,而通过细胞色素CYP450代谢活化是黄曲霉毒素致肝细胞毒性作用和致肝癌发生的重要渠道。毒素进入细胞后,通过CYP450代谢激活后,直接与肝细胞DNA结合,形成DNA结合物,致细胞发生氧化DNA双链断裂,进而导致肿瘤相关基因突变。因此调节CYP450酶活性可以有效影响黄曲霉毒素的致病性,目前除了黄曲霉毒素直接激活细胞内CYP450发挥作用外,国外已有研究表明TNF-α上调CYP450酶活性,促进肝细胞损伤,提示炎症微环境与CYP450活性存在密切关系。我们实验室前期研究发现,给予AFG1灌胃诱导肺组织出现慢性炎症反应,炎症肺组织中肺泡上皮细胞氧化应激损伤标志蛋白SOD-2以及CYP450表达明显增加;体外实验发现给予TNF-α可以通过上调CYP450活性而促进AFG1致人II型肺泡上皮细胞（alveolar type Ⅱ,AT-Ⅱ）模型A549细胞氧化应激损伤作用。提示:长期灌胃AFG1诱导慢性炎症反应可能上调CYP450活性,而促进AFG1致DNA损伤作用,而参与AFG1致肺癌发生过程。但是,经口灌胃黄曲霉毒素G1直接作用于胃肠道是否诱导小鼠肝脏出现慢性炎症反应,进而上调CYP450酶活性,促进AFG1致肝细胞氧化应激损伤还不清楚。本研究拟采用课题组前期给予AFG1灌胃6个月的Balb/c小鼠动物模型肝组织标本,在整体水平上探讨灌胃AFG1对小鼠肝组织炎症反应的影响、以及对CYP450亚型3A4表达和肝细胞氧化应激损伤的影响。本研究旨在进一步揭示慢性炎症反应在AFG1对小鼠肝细胞损伤中的作用。方法:本研究采用课题组前期给予AFG1灌胃6个月的Balb/c小鼠动物模型肝组织标本,采用免疫组织化学方法检测肝组织中SOD-2以及CYP450亚型3A4的表达;采用Real-time方法检测肝组织中相关炎症细胞因子和趋化因子的表达;采用Western blot方法检测肝组织中COX-2、SOD-2和CYP3A4的表达情况。结果:1灌胃AFG1对Balb/c小鼠肝组织炎细胞浸润和相关炎症细胞因子表达水平的影响肝组织切片HE染色结果显示,给予AFG1作用6个月明显促进肝组织汇管区和中央静脉周围炎细胞的浸润。Real-time PCR结果显示,AFG1作用明显促进小鼠肝组织中炎症相关细胞因子和趋化因子TNF-α、IL-6、IL-1、MCP-1/CCL-2、CXCL-1和TGF-β的表达。2灌胃AFG1对小鼠肝组织COX-2表达的影响Western blot结果显示,给予AFG1灌胃小鼠肝组织中COX-2在蛋白水平上的表达明显高于其在对照组的表达。3灌胃AFG1对小鼠肝组织SOD-2表达的影响SOD是生物体内重要的抗氧化酶,在许多组织损伤中其表达增高可以反应组织氧化应激损伤。免疫组化结果显示SOD-2在正常小鼠肝细胞中很少着色,而给予AFG1灌胃小鼠肝细胞胞浆中有大量棕黄色颗粒沉积,组织切片中SOD-2阳性细胞数目明显高于对照组。Western blot结果表明,AFG1处理组小鼠肝组织中SOD-2在蛋白水平表达较对照组明显升高。这一发现显示,AFG1诱导肝组织慢性炎症反应促进了小鼠肝细胞的氧化应激损伤。4灌胃AFG1对小鼠肝组织CYP3A4表达的影响免疫组化结果显示,CYP3A4在肝细胞胞浆中呈棕黄色颗粒沉积,给予AFG1灌胃小鼠肝组织中CYP3A4阳性细胞数目明显高于对照组。Western blot结果表明AFG1处理组小鼠肝组织中CYP3A4在蛋白水平表达明显高于其在对照组中的表达。结论:1灌胃AFG1可以诱导Balb/c小鼠肝脏出现慢性炎症反应,表现为炎症细胞浸润增加,上调炎症细胞因子和趋化因子的表达,以及上调重要炎症介质COX-2的表达。2灌胃AFG1明显上调肝组织氧化应激损伤的标志物SOD-2的表达,提示AFG1诱导的慢性炎症反应可以和AFG1发生协同作用,促进肝细胞氧化应激损伤。3灌胃AFG1明显上调肝组织CYP3A4的表达,提示AFG1诱导肝组织慢性炎症反应可能通过上调CYP3A4活性而促进AFG1在小鼠肝细胞的活化代谢。