甘草酸单铵盐通过调节NF-κB通路保护小鼠急性肺损伤

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目的:  1、研究甘草酸单铵盐(Monoammonium glycyrrhizinate)对小鼠急性肺损伤的保护作用。  2、研究甘草酸单铵盐(Monoammonium glycyrrhizinate)对小鼠急性肺损伤NF-κB信号通路的影响。  方法:  1、建立小鼠急性肺损伤模型。将BALB/c小鼠40只随机分为5组,每组8只,分为A:正常对照组;B:急性肺损伤组;C:急性肺损伤+低剂量甘草酸单铵盐(3mg/kg)组;D:急性肺损伤+中剂量甘草酸单铵盐(10mg/kg)组;E:急性肺损伤+高剂量甘草酸单铵盐(30mg/kg)组。向BALB/c小鼠气管内注射脂多糖(5mg/kg)建立急性肺损伤模型,24h后过量麻醉处死小鼠并收集标本。  2、HE染色观察肺组织病理改变。  3、称量肺湿重,干重,计算肺湿重/干重比值反应肺水肿。  4、BCA法测各组支气管肺泡灌洗液中蛋白含量。  5、改良纽鲍尔计数板计数BALF中总白细胞数量,并用Wright-Giemsa染色计数中性粒细胞。  6、ELISA法测各组BALF中IL-1β,TNF-α含量。  7、WB检测肺组织中NF-κ B p65,Iκ B-α的表达。  结果:  1、病理结果:LPS组小鼠HE染色显示肺组织大量炎症细胞浸润、明显肺泡壁增厚、肺泡出血,而甘草酸单铵盐治疗组可减少肺部炎症细胞浸润、减轻肺泡壁增厚、肺泡出血。  2、肺湿重/干重比值和BALF中蛋白含量:LPS组肺湿重/干重比值和BALF中蛋白含量均高于正常对照组(P<0.01),甘草酸单铵盐中、高剂量治疗组可明显降低肺湿重/干重比值和BALF中蛋白含量(P<0.05或P<0.01)。  3、BALF中总白细胞数、中性粒细胞数:LPS组BALF中总白细胞数,中性粒细胞数均高于正常对照组(P<0.01),甘草酸单铵盐中、高剂量治疗组可显著降低BALF中总白细胞数,中性粒细胞数(P<0.01)。  4、炎症因子IL-1β、TNF-α:LPS组BALF中IL-1β、TNF-α含量均高于正常对照组(P<0.01),甘草酸单铵盐中、高剂量治疗组可显著降低BALF中IL-1β、TNF-α含量(P<0.01)。  3、蛋白免疫印迹法:LPS组较正常对照组NF-κ B p65表达明显增高,Iκ B-α明显降低(P<0.01)。甘草酸单铵盐中、高剂量治疗组使得NF-κ B p65表达降低,Iκ B-α表达增加(P<0.05或P<0.01)。  结论:  1、甘草酸单铵盐(MAG)可减轻急性肺损伤小鼠的肺水肿,缓解肺部损伤,减少中性粒细胞浸润,抑制促炎细胞因子生成。  2、甘草酸单铵盐(MAG)对小鼠急性肺损伤的肺部保护作用可能是通过抑制NF-κB信号途径而发挥作用的。
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