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绿僵菌素(destruxin)是金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae等虫生真菌产生的次生代谢物质,作用于昆虫血淋巴系统,具有较好的杀虫活性。为了进一步挖掘其潜在价值,本文研究了绿僵菌素与植物源杀虫剂(苦参碱、丹皮酚、鱼藤酮、印楝素)及虫生真菌爪哇棒孢霉菌Isaria javanicus复配的联合作用,并成功配制了微乳剂和微胶囊剂。主要研究结果如下:
1.测定了绿僵菌素与植物源杀虫剂复配对棉蚜Aphis gossypii的生物活性,绿僵菌素与丹皮酚复配9/1、7/3、6/4和5/5四个配比表现为拮抗作用,其它配比则表现为相加作用或增效作用,以4/6为最佳复配配比,共毒系数为245.32,LC5o为3.33μg/mL;绿僵菌素与苫参碱复配有5个配比的共毒系数大于200,表现为增效作用,以3/7为最佳复配配比,共毒系数为936.19,LCso为0.62μg/mL;绿僵菌素与印楝素复配仅有6/4和9/1两个配比表现为增效作用,共毒系数分别为191.08和136.96,LC5o分别为5.96和6.88μg/mL;绿僵菌素与鱼藤酮复配9/l、7/3和1/9表现为增效作用,共毒系数分别为374.40、427.06和479.93,LC5o分别为0.55、0.19和0.06μg/mL,其它复配配比则表现为拮抗作用或相加作用。
2.复配剂的最佳优化配方为:有效成分30%(其中绿僵菌素9%,苦参碱21%),溶剂25.2%(其中乙酸乙酯12.6%,乙酸乙酯/乙醇/丙酮的质量比为6/4/2),表面活性剂12%~14%(其中农乳500在8%~l2%,6501在2%~4%之间),抗冻剂丙三醇6%。采用转相法配制成30%绿僵菌素·苦参碱微乳剂。质量检测结果表明其物理、化学稳定性及其他指标均符合国家标准。
30%绿僵菌素·苦参碱微乳剂对棉蚜、柑桔红蜘蛛Panonychus ciwi和烟粉虱Bemisiatabaci的LCso分别为0.59μg/mL(24h)、4.71μg/mL(24 h)和5.19μg/mL(48 h),对甜菜夜蛾Spodoptera exigua和斜纹夜蛾Slitura2龄幼虫的LC5o分别为70.69μg/mL(48h)和47.92μg/mL(48 h)。
30%的绿僵菌素·苦参碱微乳剂2500X、5000X对棉蚜的防治效果显著高于对照药剂吡虫啉3000X,施药后ld,该药剂2500X、5000X和吡虫啉3000X的防效分别为91.63%、84.52%和76.86%;施药后3d,其防效分别为92.91%、85.34%和83.50%。
3.一定浓度的绿僵菌素与SP053菌株分生孢子混用具有增效作用,S50-CD100、S25-CD100、S25-CD50及S12.5-CD100等复配组合都有显著的增效效果,以S25-CD100组合增效效果最好,其48 h和72 h的协同毒力指数(c.f.)分别达到52.31和31.07;毒力回归分析结果也显示,添加绿僵菌素25~100μg/mL的混剂的LC5o值明显降低。
4.筛选出复配微胶囊剂的最佳优化配方为:有效成分40%(32%爪哇棒孢霉分生孢子+8%绿僵菌素),囊壁(G-A)用量为12%,乳化剂T-80用量1%,pH值为3.5,温度为32℃,搅拌时间为16min,微胶囊制剂的平均粒径:30μm,平均囊壁厚度:3.85μm。质量检测结果表明,该微胶囊剂物理、化学稳定性及其他指标均符合国家标准。
该微胶囊剂具有一定的抗紫外光能力,紫外光处理微胶囊2h后,孢子萌发率不受影响。复配微胶囊剂对小菜蛾2龄幼虫96h的LCso为1.04μg/mL。田间小区试验结果表明,施药后2d、5d、8d微胶囊剂的防效分别为79.33%、84.00%和84.37%。