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Streptococcus salivarius和S.parasanguinis是母乳中普遍存在的细菌种,在我们实验室前期研究中通过使用母乳悉生小鼠模型,发现母乳细Streptococcus salivarius和S.parasanguinis是可以定植婴儿肠道的潜在菌种,然而目前关于这两株母乳细菌对宿主健康影响的研究非常少。C.elegans是一个合适的模型评价细菌的潜在益生性。我们主要关注S.salivarius F286和S.parasanguinis F278对C.elegans寿命,繁殖和发育的影响。从L4期开始,分别饲喂C.elegans不同的食物,包括S.salivarius F286、S.parasanguinis F278和E.coli OP50(线虫标准食物),并比较不同组的线虫寿命、身体尺寸和产卵量的差异。通过漂洗获得的无菌线虫卵放置于含有不同菌体(包括S.salivarius F286、S.parasanguinis F278和E.coli OP50)的平板上,持续监测3天孵化线虫的存活率并测试相应的3日龄线虫的身体尺寸。结果表明,相比于E.coli OP50(对照组),从L4期食用S.salivarius F286和S.parasanguinis F278的线虫寿命均显著延长,且两株益生菌延寿率没有显著区别,此外,从L4期食用F286线虫的身体尺寸不低于OP50组线虫,而L4期食用F278的线虫显著低于OP50组和F286组线虫,食用F278的L4期线虫身体尺寸显著低于食用OP50的线虫。食用链球菌菌株的线虫产卵总量明显减少。孵化于F278或F286菌苔平板的3日龄线虫身体尺寸显著小于在OP50菌苔上孵化的同日龄线虫,但F286组的线虫身体尺寸显著高于F278组。孵化于F286或F278的3日龄线虫存活率分别为100%和97%,与OP50组线虫没有显著区别。综合以上结果,我们得出结论,S.salivarius F286和S.parasanguinis F278可以延长线虫寿命,但是限制了线虫的生长和繁殖,提示这两株细菌的延寿作用可能部分通过能量/饮食限制引起的;F278与F278的延寿能力没有显著区别,但F286对线虫生长限制的程度显著低于F278,提示F286可能还有其他的益生机制延缓线虫衰老。为了筛选到具有抗炎特性的有益菌,研究者通常将待测细菌的发酵液上清和热致死菌体与TNF-α刺激下的人结肠腺癌细胞HT29共孵育,并测量细菌是否能够减少HT29细胞分泌的炎症因子。该测试的前提之一是待测细菌的发酵液上清或菌体不杀死或杀死<10%的HT29细胞。在前期的工作中,我们分离得到了母乳中丰度较高且能定植在无菌小鼠肠道内的Streptococcus salivarius F286和S.parasanguinis F278两株菌。在研究这两株菌的抗炎能力之前,我们利用MTT法分析不同浓度的S.salivarius F286和S.parasanguinis F278菌株的发酵液上清和热致死菌体对人结肠腺癌细胞HT29细胞的影响。结果表明,两株菌的发酵液上清及其稀释液对HT29细胞均没有细胞毒性;浓度5×10~5~7.5×10~6 cfu/mL的F286热致死菌体、浓度5×10~5~2.5×10~6 cfu/mL的F278热致死菌体对HT29细胞的细胞毒性低于10%,而浓度1×10~8 cfu/mL的F286和F278热致死菌体杀死率分别为22±5.4%和23±5.3%的HT29细胞。因此,S.salivarius F286和S.parasanguinis F278的发酵液上清原液、以及浓度5×10~5~7.5×10~6cfu/mL的F286热致死菌体和5×10~5~2.5×10~6 cfu/mL的F278热致死菌体可在HT29细胞模型中进行抗炎能力测试。