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伴随集约化生产的快速发展,母猪的不适心理状态近些年逐渐成为动物福利关注的重点。动物福利的评估主要基于对动物行为的分析,但环境生理学和比较心理学等相关领域研究的加入推动了福利研究的发展。相较于能够满足母猪福利需求的群养垫草圈,限位栏饲养是现代猪场最常用的繁殖母猪饲养模式,导致母猪生理机能减弱、繁殖利用年限缩短、淘汰率升高,并对母猪福利造成严重损害,使母猪因长期不适产生慢性应激。个体隔离、限位、贫瘠等不良因素会导致动物心理挫折,规癖行为多发,同时也常伴随抑郁的心理反应现象。规癖行为作为研究抑郁的无损观测指标,在抑郁研究中有其独特的优越性。因此,研究母猪的抑郁心理有助于更好地设置环境,改善母猪福利。本研究对完善母猪抑郁研究理论、促进母猪福利养殖有着重要的科学意义和应用价值。从后备圈舍中选择体况发育良好的待配母猪20头进行试验,配种限位饲养后进行跟踪监测。观察经过不同限位时长过程中(妊娠前期、妊娠中期、妊娠后期)的行为指标、血液理化指标及miRNA表达量的变化,探究限位母猪规癖形成过程中的行为生理机制。之后选择初产、三产、六产限位母猪各32头,对各产次限位母猪分别进行瞳孔光反应测试,根据瞳孔测试结果分为主成分综合评分<0和主成分综合评分>0两组,对各产次的不同瞳孔光反射限位母猪进行行为跟踪、新事物刺激测试、情感状态评价测试、血液理化指标及miRNA相对表达量的测定。分析不同规癖母猪的情感表达差异,明晰母猪规癖发生过程中的精神生理变化。研究结果表明:(1)随着限位时长的增加,俯卧、犬坐、无食咀嚼行为次数妊娠后期显著高于妊娠前期(P<0.05);侧卧、拱地行为次数妊娠前期和妊娠中期显著高于妊娠后期(P<0.05);白细胞介素6的含量后备圈养阶段的表达显著高于限位期各妊娠阶段(P<0.05);肿瘤坏死因子α的表达妊娠后期显著高于妊娠前期(P<0.05);miR-335、miR-16、miR-134、miR-1202的相对表达量后备圈养阶段显著高于妊娠后期(P<0.05);miR-132、miR-504、miR-30e、miR-34a的相对表达量后备圈养阶段和妊娠前期显著低于妊娠后期(P<0.05)。(2)主成分综合评分<0组中,六产母猪的站立、侧卧行为次数显著低于主成分综合评分>0组(P<0.05),六产母猪的俯卧、啃栏、啃槽行为次数显著高于主成分综合评分>0组(P<0.05),各产次母猪的犬坐、无食咀嚼行为次数均显著高于主成分综合评分>0组(P<0.05),蔗糖评分、奎宁评分同主成分综合评分>0组相比差异不显著(P>0.05),新事物的接触次数、持续接触时长均显著低于主成分综合评分>0组(P<0.05),新事物反应的延迟时间均显著高于主成分综合评分>0组(P<0.05)。但随着限位时长的增加,不同瞳孔光反射母猪中六产母猪的俯卧、犬坐、啃槽、啃栏、无食咀嚼次数均显著高于初产母猪(P<0.05),站立、侧卧、拱地次数均显著低于初产母猪(P<0.05),蔗糖评分、新事物接触次数、持续接触时长均显著低于初产母猪(P<0.05),奎宁评分、新事物反应延迟时间均显著高于初产母猪(P<0.05)。(3)主成分综合评分<0组母猪的5-HT含量均显著低于主成分综合评分>0组(P<0.05),Cortisol、IL-6、β-EP含量均显著高于主成分综合评分>0组(P<0.05),随着限位时长的增加,不同瞳孔光反射母猪中六产母猪的Cortisol、IL-6、TNF-α、β-EP含量均显著高于初产母猪(P<0.05),5-HT、DA含量均显著低于初产母猪(P<0.05)。主成分综合评分<0组母猪中,六产母猪的miR-335、miR-16、miR-134和miR-1202的相对表达量极显著低于主成分综合评分>0组(P<0.01),miR-132、miR-504、miR-30e的相对表达量极显著高于主成分综合评分>0组(P<0.01)。同时随着限位时长的增加,不同瞳孔光反射母猪中六产母猪的miR-335、miR-16、miR-134和miR-1202的相对表达量均显著低于初产母猪(P<0.05),miR-504、miR-34a的相对表达量均显著高于初产母猪(P<0.05)。结论:(1)后备母猪配种转入限位栏后,经短期的空间限位就会导致母猪规癖行为的产生,血液生理指标也会发生相应改变。(2)不同瞳孔光反射限位母猪的行为表达、情感评价、新事物刺激、生理状况及miRNA相对表达量均存在显著差异,表明主成分综合评分<0组的母猪存在更为严重的心理挫败感,更接近抑郁状态。(3)不同瞳孔光反射限位母猪中,行为表达、情感评价、新事物刺激、生理状况及miRNA相对表达量在六产母猪和初产母猪之间均存在显著差异。产次的增加会加剧不同瞳孔光反射限位母猪之间的差异。