目的支气管哮喘是一种由多种炎性细胞(T细胞、嗜酸粒细胞、肥大细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等)和炎性介质参与的气道慢性炎症性疾患,这种气道慢性炎症导致气道反应性的增加,而后两者是支气管哮喘的基本特征。在气道慢性炎症的发生、发展与持续的过程中,T细胞又被认为是关键性因素,因此,研究T细胞在支气管哮喘发病过程中的作用已成为当前研究的热点。在T细胞的分化、活化、增殖、存活与抗凋亡等一系列细胞效应过程中,多种信号转导途径参与其中,主要包括Ras/MAPK途径、PLC-γ途径、PI-3K/Akt途径、PKC/NF-κB途径、JAK/STAT途径等等。这些信号转导途径彼此之间又存在这样或那样的联系,从而共同影响了T细胞的一系列细胞效应。不同的信号转导途径在不同的T细胞亚型也有着不同的作用。PI-3K是细胞内信号转导途径中的一种关键酶,是T细胞最为重要的信号转导途径之一,与T细胞的增殖、分化、活化和抗病毒能力等密切相关,其功能主要表现为与CD28协同刺激信号一道促进T细胞活化;调节周期蛋白和促T细胞增殖因子等表达使T细胞周期正常进行;通过调控凋亡信号转导相关激酶活性和凋亡调控因子表达以拮抗P53、Fas等诱导的T细胞凋亡以及增强T细胞的抗病毒能力等等。已有报道证实PI-3K信号转导途径对Th2细胞亚型的活化、细胞因子的合成与分泌、细胞生存与抗凋亡具有重要作用。鉴于Th2细胞和细胞因子在哮喘过程的重要作用,我们希望发现在这一过程中PI-3K是否也发挥一定的作用,特别是其与T细胞的关系。因此,本次试验的目的就是首先探讨PI-3K在哮喘T细胞中的表达改变以及这种变化与T细胞活化之间的可能存在的联系,从而为研究PI-3K信号转导通路在哮喘T细胞的细胞效应之中扮演的作用作出初步的判断。方法按本实验室以往的经验制备哮喘模型。24只雄性Wistar大鼠随机均分为四组:正常对照组、哮喘激发一周组、哮喘激发二周组和哮喘激发四周组。体外培养大鼠T细胞,用免疫荧光细胞染色的方法检测不同致喘时间大鼠的T细胞内的PI-3K的表达,同时用ELISA法对对应的T细胞培养液中的IL-4的表达作出检测,并以T细胞培养液中的IL-4的表达代表哮喘T细胞的活化,然后比较不同时间PI-3K的表达以了解PI-3K表达的改变,以及这种变化与IL-4的表达变化之间的联系。结果以免疫荧光细胞染色的方法对哮喘及正常T细胞内的PI-3K的表达检测发现:PI-3K在正常T细胞内有较弱的表达,而在哮喘T细胞内这种表达明显增强,差异有显著性(p< 0.05),且在哮喘慢性期表现尤为明显,各哮喘组与正常对照组比较差异有显著性(P<0.001),哮喘二周组和哮喘四周组与哮喘一周组比较差异有显著性(P<0.05),哮喘二周组和哮喘四周组之间差异没有显著性(P﹥0.05)。同时,ELISA法进行的T细胞培养上清中的IL-4表达测定显示IL-4的表达也呈现明显的上调,各组哮喘大鼠组培养上清中IL-4的表达水平均明显高于正常组大鼠,存在差异的显著性(p值均<0.05),而各哮喘组之间的培养上清内IL-4的表达水平则没有差异显著性(P值在0.34至0.85之间)。PI-3K的表达与IL-4的表达之间存在直线相关关系(r = 0.583 , P < 0.01)。结论PI-3K在哮喘T细胞内的表达有明显的上调,而且这种上调与T细胞的活化有着正相关,提示PI-3K信号转导通路可能参与了T细胞的活化以及功能的表现,也有可能参与了T细胞的其他细胞效应,PI-3K与IL-4之间具体的因果关系还有待以后的进一步研究。