目的:探讨建立一种基于实时荧光定量RT-PCR技术(real-time RT-PCR)的喉鳞癌肿瘤细胞淋巴结微转移检测方法的可行性,为提高临床病理微转移诊断的准确性和时效性提供实验和理论依据,并寻找具有特异性和敏感性的肿瘤标记物。方法:以21例喉鳞癌患者的选择性颈清扫术后77个分区的淋巴结标本为研究对象,采用实时荧光定量RT-PCR技术定量检测各区淋巴结中细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)、鳞状细胞癌相关抗原(squmaous cell carcinoma antigen,SCCA)和寻常天疱疮抗原(pemphigus vulgaris antigen,PVA)的表达,并与常规病理苏木素伊红染色(haematoxylin-eosin staining,HE)检测和免疫组化(immunohistochemistry,IHC)检测的结果进行对照分析,进一步探讨每种检测方法的特异性和敏感性。结果:三个标记物在全部淋巴结标本中的阳性检出率均明显高于常规病理检测,差异显著(p＜0.01);常规病理阳性的淋巴结标本中的三种标记物的表达量明显高于常规病理阴性标本的表达量,差异显著(p＜0.01);免疫组化检测的结果与常规病理HE染色检测结果无显著差异(p＞0.05)。结论:应用实时荧光定量RT-PCR技术对喉鳞癌患者颈部淋巴结标本中的CK19、SCCA和PVA三个标记物进行检测,可提高喉鳞癌淋巴结微转移检测的敏感性,是一种可行的方法。三种标记物的联合应用对提高检测的特异性和准确性有很大的帮助。免疫组化与常规HE染色具有相似的微转移检出效率。