目的：1、设计制作烟雾发生装置及烟雾与细胞反应装置,组建烟雾吸入性损伤细胞分析平台。2、使用烟雾吸入性损伤细胞分析平台,检测民用黑火药烟雾对培养人支气管上皮细胞(BEAS-2B)的损伤作用,研究其损伤机制。方法：1、制作烟雾发生装置：使用无线电磁加热器引燃民用黑火药,制作实验烟雾。通过计算火药燃烧率检查火药质量。通过检测实验烟雾对细胞的损伤作用,检查实验烟雾质量。2、制作烟雾与细胞反应装置：装置内温度恒定为37。C,湿度恒定≥90%。3、细胞与烟雾反应影响因素：(1)细胞密度：(2)细胞与烟雾接触方式；(3)烟雾量大小；(4)实验后检测时间：(5)细胞培养液体积；(6)发烟材料燃烧速度：4、使用剂量为0.5g、1g、2g、4g火药制作实验烟雾,与细胞接触10min后,观察其对细胞损伤作用大小；使用相同剂量为2g火药制作实验烟雾,分别与细胞接触5min、10min、15min、20min,观察细胞损伤情况。5、观察烟雾损伤细胞内ROS含量,使用DHE染色,荧光显微镜下观察拍照,IPP软件进行数据处理分析。6、观察烟雾损伤细胞核内DNA损伤情况,使用单细胞凝胶电泳(又称彗星试验)检测火药烟雾造成的细胞核内DNA断裂情况。荧光显微镜下观察拍照,使用casp软件进行数据处理分析。7、用ELISA方法检测烟雾损伤细胞分泌IL-8的情况。结果：1、火药质量检测变异系数<5%。烟雾质量检测变异系数<10%。2、火药与细胞反应的影响因素,适宜火药检测指标为(1)细胞密度,12孔板,每孔细胞量为4×104个。(2)细胞与烟雾接触方式,使用滤网。(3)烟雾总体积>10L。(4)细胞培养液体积为1ml。(5)检测时间为24h。(6)火药5s内燃尽。3、实验烟雾火药剂量增加及与细胞接触时间的延长,对细胞的损伤加重。4、荧光染色检测单个细胞内ROS含量,随着细胞活性的降低而升高。5、单细胞凝胶电泳检测细胞核内DNA断裂,随着细胞活性降低而加重。6、细胞分泌的IL-8量随着单个细胞损伤的加重而升高。结论：设计制作的发烟装置能够稳定安全制作实验烟雾,烟雾与细胞反应装置能够实现烟雾致细胞损伤中烟雾浓度、接触时间与损伤效应呈正相关。火药烟雾对支气管上皮细胞有损伤作用,损伤机制与ROS含量增加、细胞核内DNA断裂及IL-8分泌增多相关。