目的: MDSCs是一群异质性的细胞,通常在肿瘤,感染,炎症和移植等病理情况时增多。一般认为,在病理状态下,MDSCs对免疫系统具有广泛的抑制作用,发挥调节免疫系统的功能;而正常状态下,MDSCs是否具有免疫抑制作用尚有争论。目前,多数研究是针对肿瘤和感染等病理条件下混合MDSCs或MDSCs的亚群进行研究,而对骨髓初始MDSCs的研究相对较少。本实验旨在使用Gfi1:GFP基因敲入小鼠模型,从正常模型小鼠的骨髓中分离初始MDSCs （na?ve MDSCs）,运用流式细胞仪（BD FACS Aria）分选不同亚群细胞,采用免疫学方法,研究初始MDSCs及其亚群在正常情况下可能具有的表型和T细胞免疫抑制功能;重点研究骨髓na?ve MDSCs不同亚群对T细胞功能的影响及其机制。方法:通过对Gfi1:GFP基因敲入C57BL/6J小鼠模型骨髓细胞分离纯化,利用免疫磁珠技术分离骨髓初始MDSCs（CD11b⁺细胞）,流式细胞仪检测分选纯度;利用离心涂片法和Wright Giemsa染色法对初始MDSCs进行形态学分析;将骨髓初始MDSCs分别与CD3/28 Dynabeads T-Activator预刺激的CD4⁺T或CD8⁺T细胞共培养,流式细胞术检测它们对CD4⁺T和CD8⁺T细胞增殖功能的影响。利用流式细胞技术根据CD11b、Gr1和Gfi1:GFP表达的差异将MDSCs分为不同亚群,并鉴定其表型CD62L、Ly6C、CD204、CD206、CD80、CD86、TLR4、TLR2、CD124、CD210等的表达差异;用离心涂片法和Wright Giemsa染色法对不同亚群进行形态学分析;用纯化的骨髓初始MDSCs的不同亚群细胞分别与CD3/28 Dynabeads T-Activator预刺激的CD4⁺T或CD8⁺T细胞共培养,流式细胞术检测它们对CD4⁺T和CD8⁺T细胞增殖功能的影响;并应用Realtime-PCR方法检测不同亚群细胞抗炎因子及相关酶mRNA的表达,从而初步探讨它们发挥免疫调节作用的分子机制;进而使用相关酶的抑制剂阻断并且应用流式细胞术分析进一步的观察哪一种酶起主要作用。结果:骨髓初始MDSCs是健康小鼠免疫细胞的重要组成成分,其形态为大小不一、胞质呈淡蓝色、核为分叶形、环形或椭圆形的细胞群;初始MDSCs在体外可以抑制CD4⁺T和CD8⁺T细胞增殖,在体内可以延缓和降低小鼠急性肝衰竭模型的死亡率。按CD11b、Gr1和Gfi1:GFP等分子表达的差异及细胞形态学差异可将初始MDSCs分为四个亚群:CD11b⁺Gr1⁺ GFP^-（M1）、CD11b^lowGr1^low GFP⁺（G1）、CD11b^lowGr1^high GFP+（G2）及CD11b^highGr1^high GFP⁺（G3）。在正常小鼠骨髓细胞中,G1群细胞占骨髓总细胞的1.19±0.38%,占骨髓初始MDSCs的4.04±0.9%;G2群细胞占骨髓总细胞的8.49±2.69%,占骨髓MDSCs的28.9±5.25%;G3群细胞占骨髓总细胞的6.04±1.55%,占骨髓MDSCs的20.95±4.98%;M1群细胞占骨髓总细胞的3.86±1.06%,占骨髓MDSCs的13.25±2.65%。G1群细胞体积较大主要是以环形核幼稚的粒细胞为主,G2群细胞以环形核和分叶核的幼稚粒细胞为主,G3群细胞是以分叶核和多形核幼稚粒细胞为主,而M1亚群细胞体积较小,胞质灰蓝色,多为圆形和椭圆形核,主要是幼稚单核细胞。G1和G2亚群细胞均高表达CD62L和Ly6C,M1和G3亚群细胞高表达Ly6C且部分高表达CD62L,四个亚群细胞均低表达CD204、CD206、TLR2及共刺激分子CD80、CD86和CD124（IL-4受体）,不表达TLR4和CD210（IL-10受体）。G2和G3两群细胞分别可以不同程度的抑制CD4⁺T（P<0.05;P<0.01）和CD8⁺T（P<0.01;P<0.01）细胞增殖,而G1和M1亚群细胞对CD4⁺T和CD8⁺T细胞增殖无明显抑制作用。G2和G3两群细胞可能通过上调IL-4、IL-10和IFN-γ等细胞因子的表达发挥免疫抑制作用（P<0.01;P<0.01）,该免疫抑制作用可能与ArgⅠ和NOS2两种酶的活性无关。结论:1.正常小鼠骨髓初始MDSCs（CD11b+细胞）能分别抑制CD4⁺T或CD8⁺T细胞增殖,并且能延缓和降低小鼠急性肝衰竭模型的死亡率。2.根据初始MDSCs的CD11b、Gr1和Gfi1:GFP表达差异及细胞形态学差异可将其可分为M1、G1、G2及G3四个亚群:单核系亚群细胞M1（CD11b⁺Gr1⁺ GFP^-）和粒系亚群细胞G1(CD11b^lowGr1^low GFP+)、G2 (CD11b^lowGr1^high GFP⁺)及G3(CD11b^highGr1^high GFP⁺)。3.在骨髓初始MDSCs四个亚群中,G2和G3均能不同程度的抑制CD4⁺T和CD8⁺T细胞增殖,而G1和M1对CD4⁺T和CD8⁺T细胞的增殖无明显抑制作用;G2亚群细胞可能通过分泌抗炎因子IL-4、IL-10发挥免疫抑制作用,G3亚群细胞可能通过分泌抗炎因子IL-10和炎性因子IFN-γ发挥免疫抑制作用。4.骨髓初始MDSCs的G2和G3亚群细胞对CD4⁺T和CD8⁺T细胞增殖抑制作用的机制可能与NOS2和ArgI两种酶无关。