植物真菌病害导致的农作物减产和采后损失一直以来都是阻碍农业生产的关键问题之一,生物防治植物真菌病害因为在应用中具有对环境安全、无污染、特异性强、不产生抗药性等优点而受到越来越多的关注。内生菌可以被用来防治植物真菌病害,并且部分菌株已经被研发成生物农药用于农业生产当中。独角莲具有广泛的药理作用和丰富的化学成分,并且在生长过程中不易感染病虫害,联系植物内生菌的广泛生物学功能推测,与独角莲长期协同进化的内生菌也可能具有一定的独特性和研究价值,已有研究也表明药用植物中含有丰富的生物防治资源菌,但关于独角莲内生菌的研究还未见报道。为了给生物防治植物真菌病害提供新的菌种资源,本研究对独角莲中的内生菌进行了分离,并筛选得到了一株广谱植物病原真菌拮抗菌TG116,测定了菌株TG116对植物病原真菌的抑菌谱和抑菌特性,通过盆栽防病试验对其生防潜能进行了进一步的验证和探索,利用形态学、生理生化及分子生物学方法对其进行了鉴定,并对其生物学特性和有关生物防治植物病害的机理进行了研究,结果如下:(1)菌株TG116能够拮抗供试的7种不同植物病原真菌,抗菌谱较广,并且可以使植物病原真菌菌丝原生质外渗,菌丝中空、形态扭曲、变形等,菌株TG116浸种和灌根的处理在盆栽防病试验中也有较好防治效果,随着TG116菌液处理后接种植物病原真菌间隔时间的延长,防病效果也有所提高,TG116胞外代谢产物和菌体都有一定的防病效果。(2)菌株TG116的形态学及生理生化特征和地衣芽孢杆菌相吻合,16S rRNA序列的分析比对结果显示其与地衣芽孢杆菌的同源性高达99%,因而将菌株TG116鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。(3)菌株TG116培养8-16 h生长处于对数期,16 h后进入稳定期,48 h后进入衰退期;最适接种量为1%;在20-60℃的温度范围内都能够生长,45℃为最适生长温度;在pH 3.0-9.0的范围内都能够生长,最适生长pH为7.0;在1%的NaCl渗透压条件下生长最好;对供试碳源、氮源利用率最高的分别为纤维二糖和酵母粉;菌株TG116对环境的适应能力较强。(4)在一定时间段内经菌株TG116诱导的处理黄瓜叶片中PAL、POD、PPO活性都显著高于未经其诱导的处理,与植物病原真菌共同接种时以上酶活性升高的幅度比单独接种菌株TG116的大,说明同时接种病原菌有利于菌株TG116诱导抗性的表达;单独接种菌株TG116后,黄瓜叶片中SOD活性也有所上升,但上升幅度并不明显,MDA含量变化不大且略低于对照水平;菌株TG116能够分泌蛋白酶和纤维素酶。推测菌株TG116的生物防治机理包括了诱导植物PAL、POD、PPO等相关防御酶的活性升高,降低活性氧类物质的含量,减轻膜脂质过氧化损伤,分泌病原真菌胞壁降解酶等多个方面的协同综合作用。