肺癌是全球最大的杀手之一,其可分为小细胞肺癌和非小细胞肺癌,其中最常见的是非小细胞肺癌。在非小细胞肺癌中,约有150万患者存活率不到20%。随着科技的进步,非小细胞肺癌的治疗虽取得了一些进展,但总体而言效果仍不太理想,寻找新的有效且无副作用的治疗手段很有必要。非小细胞肺癌在中医学中可以归于“咳嗽”、“痰饮”、“息奔”、“肺积”、“咯血”、“肺花疮”、“声瘖”、“胸痛”等疾病范畴,诸多临床与基础研究证实,清热燥湿法是临床治疗肺癌的方法之一。黄连是清热类中药之常用药,盐酸小檗碱存在于黄连的根和皮中,是黄连生物碱提取物的主要有效成分之一。前期研究已经发现黄连可以有效抑制非小细胞肺癌,但对盐酸小檗碱抗非小细胞肺癌的研究仍有很大的空白。本研究以A549、H1299和H1975非小细胞肺癌细胞为研究对象,通过MTT比色实验和平板克隆实验探究盐酸小檗碱在体外对非小细胞肺癌生长增殖及细胞集落形成的影响;通过坏死和凋亡测定实验、基因芯片表达分析实验、实时荧光定量PCR实验和蛋白免疫印迹实验探究盐酸小檗碱抗非小细胞肺癌的活性机制;通过将LLC细胞皮下注射到C57BL/6小鼠的右腋窝中从而建立荷瘤小鼠模型,测定荷瘤小鼠肿瘤、体重和生存变化来探究盐酸小檗碱对荷瘤小鼠的影响;通过对荷瘤小鼠体内肿瘤组织切片,苏木精-伊红染色实验和免疫组织化学实验来探究盐酸小檗碱在体内对肺癌的影响。(1)在探究对细胞生长的影响实验研究中,研究发现,盐酸小檗碱可以显著的抑制A549、H1299和H1975非小细胞肺癌细胞的生长增殖及细胞集落的形成,且抑制程度与盐酸小檗碱的处理浓度和处理时间相关,即盐酸小檗碱的处理浓度越高、处理时间越长,抑制效果越好;(2)在坏死和凋亡测定实验研究中,研究发现,在盐酸小檗碱处理下,A549、H1299和H1975非小细胞肺癌细胞均集中在坏死区域,且凋亡蛋白Caspase3和PARP1均没有发生剪切;(3)在基因芯片表达分析、实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹实验研究中,研究发现,在盐酸小檗碱处理下,A549细胞中有646个基因差异表达,这些差异表达的基因涉及7个信号通路,其中DNA复制和嘧啶代谢信号通路中涉及的因子FOXM1是一个转录因子,其靶向的基因RRM1、RRM2、LIG1和POLE2下降具有显著差异。在盐酸小檗碱处理下,A549、H1299和H1975非小细胞肺癌细胞中RRM1、RRM2、LIG1、POLE2基因表达和蛋白表达水平均下降且具有显著差异,FOXM1的蛋白表达水平也下降且具有显著差异;(4)在体内实验研究中,研究发现,盐酸小檗碱可以显著的抑制荷瘤小鼠体内肿瘤的生长且能延长荷瘤小鼠的生存期,并对荷瘤小鼠的体重变化没有影响,其中中浓度(200 mg/kg)盐酸小檗碱效果最好;苏木精-伊红染色实验发现,盐酸小檗碱可以增大荷瘤小鼠体内肿瘤坏死区域并减少肿瘤细胞的细胞核数目;免疫组织化学实验发现,盐酸小檗碱可以降低荷瘤小鼠体内肿瘤FOXM1、RRM1、RRM2、LIG1和POLE2的表达水平。根据本研究结果,我们认为盐酸小檗碱可抑制非小细胞肺癌生长,其活性机制与抑制FOXM1的表达从而影响非小细胞肺癌的DNA复制进程有关,其可能是一种抗非小细胞肺癌候选药。