论文部分内容阅读
目的:探讨不同温度下顺铂热化疗对卵巢癌细胞skov-3生长侵袭转移的影响。方法:对卵巢癌细胞skov-3进行常规体外培养,将处于对数生长期的细胞随机分为八组:正常对照组(37℃组)、39℃组、40℃组、41℃组、42℃组、43℃组、44℃组和45℃组,顺铂作用浓度为5μg/ml,加热时间为60min。(1)倒置相差显微镜观察细胞的形态学变化;(2)四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定各组细胞抑制率;(3)流式细胞仪(flow cytometry,FCM)分析细胞周期的分布并测定细胞凋亡率;(4)免疫组织化学法检测各组细胞中HSP70的表达;(5)逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase PCR,RT-PCR)检测S100A4mRNA的表达。结果:(1)倒置相差显微镜下观察细胞形态可见对照组37℃组细胞大小正常,生长良好;随温度升高,各组细胞形态发生改变,细胞生长不良,细胞数渐减少,变小变圆,当温度升至43℃时部分细胞崩解死亡,呈漂浮状态,44℃和45℃细胞分布稀疏,偶见细胞碎片,形成凋亡小体。(2)MTT法、FCM法、RT-PCR法检测结果显示各组与对照组比较,细胞抑制率升高(P<0.05)、凋亡率显著升高(P<0.01),S100A4mRNA的表达量显著降低(P<0.01),当温度达43℃时,细胞抑制率、凋亡率达最高,S100A4mRNA的表达量达最低;43℃、44℃和45℃三组之间表达无差异(P>0.05);(3)FCM分析细胞周期显示各组细胞与对照组比较G0/G1期细胞比例增高(P<0.05),S期细胞比例下降(P<0.05)。细胞生长阻滞于G0/G1期。各温度组之间差异显著(P<0.01)。(4)免疫组织化学法结果显示温度在39℃～42℃之间与对照组比较HSP70表达增加(P<0.05),容易形成热耐受,各组之间表达无差异(P>0.05);当温度超过43℃后,HSP70表达渐减少,各组之间表达无差异(P>0.05)。结论:不同温度下顺铂热化疗均可抑制卵巢癌细胞skov-3的生长、侵袭和转移,在43℃时可显著抑制其生长、侵袭和转移,在43℃下热化疗可减少热耐受的形成,提高治疗疗效。在卵巢癌的腹腔热灌注化疗时,43℃可能是最适温度。