论文部分内容阅读
【目的】川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)是一种具有活血化淤、抗氧化、抗炎的中药提取生物碱,有保护肾脏、稳定肾功能的作用;肾小球足细胞损伤是儿童肾病综合征肾小球损伤的主要病理基础;目前已发现PI3K/AKT通路在肾脏疾病的发生和转归中起重要作用。本研究将建立嘌呤霉素损伤足细胞模型,在体外实验中探讨TMP是否可激活PI3K/AKT信号通路拮抗嘌呤霉素对足细胞的损伤。【方法】1.建立嘌呤霉素诱导足细胞损体外模型。运用MTT法筛选嘌呤霉素最佳造模浓度。2.探讨TMP对嘌呤霉素诱导的足细胞损伤模型的保护作用。MTT法检测足细胞活力筛选TMP最佳干预浓度及观察其保护作用。3.探讨TMP对嘌呤霉素诱导的足细胞损伤模型中PI3K/AKT通路的影响。蛋白免疫印迹法(Western Blotting)检测Nephrin蛋白、p-akt、akt的表达,观察TMP对嘌呤霉素损伤足细胞模型中细胞内PI3K/AKT通路的激活情况。4.探讨PI3K/AKT通路抑制剂LY294002对TMP在嘌呤霉素诱导的足细胞损伤模型中保护作用的影响。蛋白免疫印迹法检测Nephrin蛋白、p-akt、akt的表达观察PI3K/AKT通路的抑制效果。【结果】1.嘌呤霉素可诱导足细胞损伤使细胞活力下降,并下调Nephrin蛋白的表达。2.TMP可改善嘌呤霉素诱导的足细胞损伤模型的细胞活力及上调Nephrin蛋白的表达。3.TMP可激活嘌呤霉素诱导的足细胞损伤模型PI3K/AKT通路,调控p-akt的表达。4.PI3K/AKT通路抑制剂LY294002可逆转TMP对嘌呤霉素诱导的足细胞损伤模型细胞活力的改善及下调Nephrin蛋白的表达。【结论】川芎嗪可激活PI3K/AKT信号通路保护嘌呤霉素诱导的足细胞损伤模型