浙江省汉坦病毒的分子流行病学研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rtpy1015
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究浙江省啮齿动物中汉坦病毒流行情况及病毒型别,为该地区肾综合征出血热的预防控制提供科学依据。分析两株汉城病毒的遗传特征,研究其与已知汉坦病毒及其疫苗株之间的关系。   方法:于2006~2007年在HFRS疫区:宁波慈溪和温州的瑞安、瓯海的疫点周围的野外及居民区用鼠笼捕鼠,采集鼠肺标本。用间接免疫荧光法(IFA)检测鼠肺中HV抗原,从抗原阳性鼠肺组织中提取RNA,用RT-PCR法扩增阳性样品中HV的S和M基因片段,纯化回收测序后,将扩增片段的核苷酸序列与已知病毒的核苷酸序列进行比较,使用DNAStar软件包进行序列排序及同源性分析,用PHYLIP软件包进行系统发生分析,以邻位相连法(Neighbor-joining method,NJ)构建系统发生树进行系统发生分析及分型。对扩增到的两株HV的全M与S基因片段测序后进行序列特征分析和系统发生分析。使用Protean、SignalP、TMHMM软件对基因片段核苷酸序列的疏水区、信号肽区和跨膜区进行分析。   结果:在慈溪和温州这两个地区共捕获461只啮齿动物、199只食虫目动物。其中在241只褐家鼠中检测到10份阳性样品,阳性检出率为4.15%,在122只黄胸鼠中检测到10份阳性标本,检出率为8.20%,在196只鼩鼱中检测到6份抗原阳性标本,检出率为3.06%。用汉城病毒(SEOV)特异引物从其中17份HV抗原阳性样品中扩增出17份部分S片段(620~999nt)、14份全S片段、2份全M片段及15份部分M片段(2001~2301nt)并测定序列。对扩增出的部分S、M及全S、M片段的核苷酸序列分析发现,17株病毒与现有的SEOV有高同源性,均为汉城型HV,所构建的系统进化树显示,17株病毒构成两个单元支,分别在第一和第三亚型,近年来的分子流行病学发现,已知的SEOV中以1和3基因亚型在我国分布最为广泛。汉坦病毒CixiRn21株和OuhaiRn251株的S基因片段核苷酸序列全长均为1771nt,都仅有1个开放读码框(ORF),编码429个氨基酸,M基因片段核苷酸序列全长均为3654nt,编码1133个氨基酸。这两株汉坦病毒与绝大部分已知的SEOV有最高的同源性;但与汉滩病毒等其它病毒同源性较低。这两株病毒的核蛋白与糖蛋白氨基酸序列与疫苗株Z37具有一致的结构。   结论:由于捕获的啮齿动物中以鼠属居多并且仅在啮齿动物中扩增到HV,因此推测浙江省现阶段的肾综合征出血热可能主要是由SEOV引起的,所以应加强对SEOV引起的出血热的监测和防治工作。所扩增到的17株汉坦病毒间有很高的同源性,没有明显的地理聚集现象,SEOV呈世界性分布,而且除Gou3外核苷酸和氨基酸的序列较为保守,变异较小,有高度的同源性,可能是因为存在共同的祖先以及SEOV的宿主动物(褐家鼠等鼠类)比其它宿主动物的流动性强,容易追随人类活动而迁徙,从而造成SEOV的播散。CixiRn21株和OuhaiRn251株与包括疫苗株Z37在内的已知SEOV具有高度的同源性和相似的二级结构,提示当前的疫苗能有效预防HFRS的流行。
其他文献
全球工业化发展的不断推进,导致地球表层大气温度逐年上升,高温热害已对水稻生长发育造成严重影响,给我国粮食生产安全带来巨大威胁。选用耐热品种是减轻作物高温胁迫的有效
锰作为小麦的必须微量元素,对小麦的生长发育起着十分重要的作用。本研究通过水培筛选出了耐缺锰能力有显著差异的小麦品种。然后以对锰不敏感的川麦44和对锰敏感的绵阳11作为
学位