组蛋白乙酰化修饰在异氟烷遗忘机制中的作用

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目的:探讨组蛋白乙酰化修饰在异氟烷遗忘机制中的作用。方法:SPF级8周龄雄性C57BL/6J小时≥4只,体重18-22g,随机分为3组(n=18):对照组(C组)、异氟烷组(ISO组)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠组(SB组,Sodium butyrate)。C组吸入35%氧气30min,条件恐惧训练后腹腔注射生理盐水;ISO组吸入35%氧气和0.4%异氟烷的混合气体30min,条件恐惧训练后腹腔注射生理盐水;SB组吸入35%氧气和0.4%异氟烷的混合气体30min,条件恐惧训练后腹腔注射丁酸钠(1.2g/Kg)。于条件恐惧训练结束后1h随机抽取各组小鼠6只处死,取其海马组织,采用蛋白免疫印迹(Western blotting, WB)法测定其乙酰化组蛋白H3(Acetylated histone H3, Ac-H3)和乙酰化组蛋白H4(Acetylated histone H4, Ac-H4)表达水平,其余小鼠进行条件恐惧测试和旷场实验,测定小鼠记忆能力、自主活动能力和焦虑状态。结果:1.小鼠自主活动能力和焦虑状态结果:旷场实验中实验各组组间总路程和中央区时间均无明显差别(p>0.05)。运动轨迹图均表现为在中央区探索较少而在周边区明显增多。2.小鼠遗忘行为学结果:训练阶段各组小鼠凝滞时间百分比差异无统计学意义(p>0.05)。与C组比较,ISO组测试阶段凝滞时问百分比明显降低,差异有统计学意义p<0.05);与ISO组比较,SB组测试阶段凝滞时间百分比明显升高,差异有统计学意义(p<0.05)。3.小鼠海马Ac-H3和Ac-H4表达水平蛋白免疫印迹结果:与C组比较,ISO组海马Ac-H3和Ac-H4表达水平明显下调,差异有统计学意义(p<0.05);与ISO组比较,SB组海马Ac-H3和Ac-H4表达水平明显上调,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:1.组蛋白乙酰化修饰在异氟烷遗忘机制中起作用,且组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠能部分消除异氟烷遗忘作用。2.H3和H4可能为组蛋白乙酰化修饰调控异氟烷遗忘作用的重要修饰蛋白。3.海马是调控异氟烷遗忘作用的重要部位。
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