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研究目的:肺癌是致全球肿瘤相关死亡的最主要因素,由于早期临床表现不明显,且缺乏特异性的早期筛查手段,多数患者确诊时已属晚期。肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)是肺癌的重要组成部分,鉴于传统肿瘤分子标记的不足,本课题通过对LUAD患者血清外泌体mi RNA进行芯片分析及实时荧光定量PCR验证,旨在发现对LUAD有潜在诊断价值的血清外泌体mi RNA,并探索目标mi RNA在LUAD中初步功能。方法:通过Western blot检测外泌体分子标记物及透射电镜(TEM)进行形态学观察;mi RNA芯片技术用于分析LUAD患者血清外泌体中差异性表达的mi RNA;挑选5种高表达及5种低表达的mi RNA进行实时荧光定量PCR初步验证;选取最高表达及最低表达的mi RNA进行扩大样本验证,并探索其表达水平与临床参数之间的关系;受试者工作特征曲线(ROC)用于评估mi RNA的诊断效能;mi R-7977 inhibitor转染用于构建低表达mi R-7977的A549细胞株,通过CCK8、侵袭实验,流式细胞术检测低表达mi R-7977对A549增殖、侵袭,凋亡能力的影响。结果:Western blot结果显示我们提取物表达外泌体分子标记CD9、CD63;透射电镜下可见其大小及形态与外泌体相符。mi RNA芯片结果显示,31个mi RNA在肺癌患者血清来源外泌体中表达上调,29个mi RNA表达下调。随后对5种上调mi RNA(mi R-451a、mi R-7977、mi R-1260a、mi R-7641、mi R-197-3p)及5种下调mi RNA(mi R-133b、mi R-1185-1-3p、mi R-4284、mi R-4463、mi R-98-3p)进行实时荧光定量PCR初步验证,结果显示mi R-451a、mi R-7977和mi R-7641在病例组中表达上调;mi R-98-3p和mi R-133b表达下调。选取mi R-7977及mi R-98-3p进行扩大样本验证,结果显示在LUAD患者血清外泌体中mi R-7977显著高表达(p<0.05),而mi R-98-3p则低表达(p<0.05)。mi R-7977的表达水平与N分期及TNM分期显著相关(p<0.05)。mi R-7977及mi R-98-3p的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.787(95%CI:0.705-0.855)、0.719(95%CI:0.632-0.796)。当两者联合时ROC曲线下面积为0.816(95%CI:0.737-0.880),联合诊断效能显著优于单独指标。与正常肺上皮细胞(Beas-2b)相比mi R-7977在LUAD细胞(A549)中显著高表达。低表达mi R-7977显著增强A549细胞增殖活性及侵袭能力,抑制其凋亡。结论:mi R-7977在LUAD细胞株A549及LUAD血清来源外泌体中表达水平显著升高,其表达水平与N分期及TNM分期显著相关。降低A549细胞中mi R-7977表达能促进A549细胞增殖,抑制其凋亡,增强其侵袭能力。血清来源的外泌体mi R-7977具有作为诊断LUAD分子标记物的潜能,同时mi R-7977可能成为LUAD治疗的靶标。