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铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是院内最常见的条件致病菌之一,可引起大规模的院内感染。患者在免疫力低下、长期使用激素、肿瘤化学治疗、放射线治疗、手术、使用导尿管等体外治疗操作等情况下易感染此菌。近年来我院铜绿假单胞菌临床分离率呈逐年上升趋势,已跃居非发酵菌首位,且出现较多耐药甚至是泛耐药菌株,这些耐药菌株的出现,不但延长了疾病的治愈时间,同时增加了治疗的难度和成本。一直以来,氨基糖苷类抗生素是治疗铜绿假单胞菌感染的重要的抗生素之一,但随着此类药物在临床中的大规模应用,越来越多的铜绿假单胞菌对其产生耐药性,而耐药机制亦表现为多样性。近年来的研究表明,在介导氨基糖苷类抗生素耐药的众多机制中,最为重要的除之前较引人注目的氨基糖苷修饰酶外,还有一种新型的耐药机制：16S rRNA甲基化酶介导的氨基糖苷类抗生素耐药。据报道此酶不但可以介导细菌的氨基糖苷类抗生素耐药,还可以通过种属间传播并与其他耐药基因协同介导对其他类型抗生素耐药,故此耐药机制已成为目前研究的热点。为了解我院铜绿假单胞菌临床分离株中对氨基糖苷类抗生素的耐药机制及耐药基因的分布情况,对我院2009年1月至2010年10月间收集到的156株铜绿假单胞菌通过K-B纸片药敏试验筛选出氨基糖苷多重耐药菌株(即对庆大霉素、妥布霉素、奈替米星、阿米卡星四种药物中至少3种耐药),并用PCR的方法对其进行16S rRNA甲基化酶的armA、rmtB,乙酰基转移酶的aac(3’)-Ⅰb、aac(6’)-Ⅱ四种耐药基因的扩增,同时对所分离的30株耐药菌株的临床分布情况进行了统计研究结果显示,从收集到的156株铜绿假单胞菌中分离出对庆大霉素、妥布霉素、奈替米星耐药的菌株30株,其分离率为19.2%,其中有3株还对阿米卡星耐药,分离率为2%。对该30株菌株进行基因扩增得出,aac(3’)-Ⅰb:21株,分离率为70%,aac(6’)-Ⅱ：7株,分离率为23.3%,rmtB：3株,分离率为10%,未见表达armA基因的菌株。可见,在我院分离的铜绿假单胞菌氨基糖苷类抗生素的耐药机制中,乙酰基转移酶的分离率所占比例较高；而在两种较常见的16S rRNA甲基化酶中,我院以rmtB型为主。通过对氨基糖苷多重耐药菌株的临床分布进行统计可以发现,神经外科分离率最高,占63.4%,故应引起相关科室注意。