血红素结合蛋白((heme-binding protein, HBP)一般属于球蛋白,分子中起码有一个或多个血红素结合区,能与血红素(原卟啉Ⅸ,heme)结合。目前认为HBP具有多种生理功能,包括作为氧感受器、运送游离血红素、参与机体代谢等功能。但对于HBP的许多功能及其作用原理还有许多并不清楚。相同的血红素辅基如何被不同的蛋白质分子所利用,来执行不同的生物功能,一直是化学生物学和蛋白质化学研究领域所关注的重点。国内外众多的科研工作者进行了长期而广泛的研究,并试图通过对此问题的解答来认识蛋白的结构-性质-反应-功能之间所蕴含的关系。而研究HBP就可能为解决这些问题提供实验数据。根据亲和层析的原理,把血红素作为配基制备亲和层析柱用于纯化HBP,为进一步研究HBP打下基础。惰性分子筛填料Sephadex-25经环氧氯丙烷活化后,直接与氯化血红素反应使血红素固定于Sephadex-25上,制成血红素作为配基的亲和层析柱。测定结果表明,载体与血红素的偶联率较高,每克溶胀的Sephadex-25凝胶颗粒能固定高于1.56 mg的血红素。将此亲和层析柱用于分离纯化HBP的试验证明,其特异性强,分离效果好。从大肠杆菌中分离到两种多肽,经SDS-PAGE检测,一种多肽的分子质量约为33KDa,另一种约为15 KDa。吸收光谱分析说明这些多肽能与血红素作用,具有HBP的性质。实验结果表明利用此亲和层析系统可快速、特异性地分离HBP。这为进一步研究HBP的功能、蛋白质结构与功能的关系奠定了基础。