丹蛭降糖胶囊治疗糖尿病肾脏病患者临床观察及对大鼠Klotho、FGF2蛋白表达的影响

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目的:观察丹蛭降糖胶囊治疗早期2型糖尿病肾脏病(diabetes kidney disease,DKD)的临床指标和疗效,以及对糖尿病肾脏病大鼠模型klotho、FGF2表达的影响。探讨丹蛭降糖胶囊对2型糖尿病肾脏病的疗效作用环节和机理,提供临床资料与理论依据。方法1临床研究将纳入试验的DKD(Diabetic Kidney Disease)患者随机分为治疗组30例和对照组30例,均予口服降糖药或注射胰岛素等常规降糖方案治疗,并常规服用氯沙坦钾50mg,每天早晨一次。治疗组在上述基础治疗之上加用口服丹蛭降糖胶囊,一天3次、一次3粒。本研究一个疗程4周,连续观察3疗程。采集标本检测并记录治疗前后的空腹血糖(FPG)、餐后2小时血糖(2h PG)、糖基化血红蛋白(Hb A1c)、尿微量白蛋白/尿肌酐(ACR)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),以及中医证候积分。2实验研究从70只SD大鼠随机选取10只大鼠作为空白组。其余60只作为造模大鼠,予以高糖高脂饲料喂养4周后单次腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ),建造DKD大鼠模型。造模过程中死亡及不合格9只。将造模成功的大鼠随机分为模型组11只、氯沙坦钾组10只、丹蛭降糖胶囊高、中、低剂量组分别各10只。高、中、低剂量组分别予以0.66g/kg·d、0.33g/kg·d、0.17g/kg·d灌胃,氯沙坦钾组予以氯沙坦钾10mg/kg·d灌胃,空白组和模型组均给予生理盐水5ml/kg·d灌胃,给药时间为8周。试验结束后取材检测肾功能、血糖、糖基化血红蛋白,肾脏组织HE染色观察病理改变,Western blot检测肾脏组织Klotho、FGF2蛋白含量。结果1临床研究结果纳入的患者有55例完成本次试验。治疗结束后,治疗组和对照组的总有效率分别为78.6%和51.9%(P<0.05)。与治疗前比较,两组患者的中医证候量化积分均下降(P<0.01);治疗组中医证候积分较对照组下降更明显(P<0.05)。治疗后FPG、2h PG、Hb A1c、SCr、BUN和ACR均有下降(P<0.05)。治疗组与对照组比较,治疗组患者的2h PG、Hb A1c、Scr、BUN和ACR水平下降更明显(P<0.01),FPG水平下降(P<0.05)。2动物实验结果治疗后,与空白组比较,模型组与各治疗组大鼠体重均下降(P<0.01),与模型组比较,各治疗组体重增加(P<0.05)。与模型组比较,丹蛭降糖胶囊高、中、低剂量组FPG均下降(P<0.01),氯沙坦钾组无明显差异(P>0.05);丹蛭降糖胶囊高、中剂量组及西药组的Scr、BUN均明显下降(P<0.01),中药低剂量组大鼠Scr降低(P<0.05);与模型组比较,丹蛭降糖胶囊治疗组与氯沙坦钾组24h UP均降低(P<0.01).HE染色发现空白组大鼠肾脏组织病理形态未见明显异常,模型组可见肾小球、基底膜病理改变,治疗组与模型组相比病理改变减轻。Westem blot检测结果与空白组比较,模型组大鼠肾脏组织的klotho表达减少、FGF2表达增多(P<0.01),与模型组比较,丹蛭降糖胶囊高剂量组、氯沙坦钾组klotho表达增多(P<0.01)、中剂量组klotho表达稍增多(P<0.05)、低剂量组klotho表达增多不明显(P>0.05);丹蛭降糖胶囊高、中剂量组、氯沙坦钾组FGF2表达减少(P<0.01)、低剂量组FGF2表达稍减少(P<0.05)。结论:丹蛭降糖胶囊可明显改善早期DKD患者气阴两虚的临床症状,减轻DKD大鼠肾脏损害、其机制可能与增强klotho表达、减少FGF2表达有关。
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