单肺机械通气与呼吸机相关性肺损伤的研究

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【目的】研究单肺机械通气(One lung ventilator, OLV)和双肺机械通气过程中,两种不同通气模式与呼吸机相关性肺损伤(ventilator associated lung injury, VALI )的关系,探讨实施OLV的安全性。【方法】 大白兔12只,雌雄不限,体重2.5±0.2kg,随机分为对照组(双肺机械通气)和实验组(单肺机械通气),每组6个动物。在兔耳缘静脉建立静脉通道,注射戊巴比妥钠麻醉后,置动物于仰卧位并固定四肢。手术分离动物左下肢股动脉,穿刺留置25G套管针并肝素化,用于持续监测动脉血压和采集血样;手术分离主气管,在静脉给予琥珀胆碱(10mg/kg)后,行气管切开并插入ID3.5mm气管导管实施机械通气,呼吸机通气参数为:FiO2 0.7 , RR 25/min,VT 8 ml/kg。用微量泵连续静脉推注氯胺酮及琥珀胆碱(20mg.kg-1.h-1),以维持动物的麻醉和肌松。实施机械通气后,两组动物均在右胸第6肋间隙切开右侧胸腔并暴露肺脏。实验组将气管导管推入动物的左侧支气管而建立左肺OLV动物模型;通过观察到右侧肺叶呼吸运动停止并逐渐萎陷而确定OLV模型的成功建立。实验组进行单肺通气120分钟后,将气管导管退出至主气管而恢复到双肺通气;对照组动物则始终保持双肺通气。两组动物模型在机械通气180分钟后采用股动脉放血的方法处死动物。实验检测指标:①在机械通气前和机械通气后60、120、150、180分钟抽取股动脉血行血气分析。②取肺组织制作组织切片,经苏木精和伊红(Hematoxylin <WP=4>and Eosin ,HE)染色后,通过病理图像分析系统对肺组织进行图像拍摄,人工对照片中多形核嗜中性粒细胞(Polymorphonuclear neutrophil , PMN)进行计数。③用透视电镜,观察肺组织细胞内部的超显微结构改变。④用肺组织湿/干重比的方法,评测肺组织的水分含量。⑤酶联免疫吸附(Enzyme-linked immunoadsordent assay,ELISA)方法测定支气管-肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid , BALF)中肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-alpha ,TNF-α)浓度。【结果】①对照组各时点的PaO2值没有显著性的差异;实验组在单肺通气各时点的PaO2要低于双肺机械通气组相应各时点的PaO2;在恢复双肺通气30分钟后,实验组的PaO2依旧低于双肺通气组;在恢复双肺通气60分钟后,两组动物的PaO2无显著的差异。②实验组动物右肺(不通气肺)肉眼观可见部分区域有肺不张存在。③对照组和实验组的肺组织中PMN计数有显著的差异,实验组右肺(不通气肺)组织的PMN浸润程度最高。两组动物对应肺组织间的PMN计数有显著性差异,实验组肺的PMN浸润程度均较对照组对应肺严重;实验组动物右肺某些肺泡腔内有渗出的水肿液。④实验组和对照组的肺组织的肺泡I型细胞在电镜下的表现无明显的差别,他们的基底膜均完整;两组动物的肺Ⅱ型细胞都出现了相同的形态上的改变,细胞内的板层体内容物都释放成空泡状,细胞微绒毛变短小、数量少,胞质出现不规则裂隙;实验组动物肺内的单核巨噬细胞内可见许多增大、增粗的腺粒体与溶酶体,而对照组的单核巨噬细胞内的改变无实验组明显。⑤实验组左肺与对照组左肺组织的湿干重比差异有统计学意义;实验组右肺(不通气肺)与对照组右肺组织的湿干重比差异<WP=5>有统计学意义。实验组肺的含水量明显多于对照组。⑥两组动物的BALF中均检出TNF-α,但他们之间的浓度差异无统计学意义。【结论】 在实施OLV的过程中,虽然萎陷侧肺受到机械牵张时间要比双肺机械通气的短,但是并不能减少发生VALI的机会,在形态学方面的表现,单肺机械通气组动物的肺损伤程度较双肺通气组严重。
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