β-烯醇化酶及mRNA在COPD患者下肢骨骼肌表达水平研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yigeyongbao
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目的:测定p-烯醇化酶蛋白及其mRNA水平在正常对照组、COPD非萎缩组、COPD萎缩组表达情况,探讨p-烯醇化酶在两种不同表型(萎缩型和非萎缩型)COPD的调控机制。方法:收集昆明医科大学第一附属医院骨科手术诊疗患者股四头肌标本,其中正常对照组11例,COPD非萎缩组14例,COPD萎缩组12例。采用RT-PCR测定37例患者β-烯醇化酶mRNA水平,采用Western Blot技术检测37例患者β-烯醇化酶蛋白,分析比较3组患者股四头肌p-烯醇化酶mRNA转录水平及蛋白表达差异,结合患者去脂肪指数及股四头肌周径等影响因素,探讨β-烯醇化酶在两种不同表型(萎缩型和非萎缩型)COPD的调控机制。结果:1.β-烯醇化酶蛋白相对表达量:①与正常组比较,COPD骨骼肌萎缩组患者股四头肌中β-烯醇化酶蛋白表达显著升高(P<0.05):②与正常组比较,COPD骨骼肌非萎缩组患者股四头肌p-烯醇化酶蛋白表达虽然有升高趋势,但差异不显著(P>0.05);③与COPD骨骼肌萎缩组比较,COPD骨骼肌非萎缩组患者股四头肌β-烯醇化酶蛋白表达无差异(P>0.05)。2.p-烯醇化酶mRNA的相对表达量(2-ΔΔCt):COPD骨骼肌萎缩组、COPD骨骼肌非萎缩组、正常对照组患者股四头肌β-烯醇化酶mRNA表达具有差异性(P<0.05),进一步两两比较,各组间差异均有统计学意义,COPD骨骼肌萎缩组中p-烯醇化酶表达明显高于COPD骨骼肌非萎缩组、正常对照组,COPD骨骼肌非萎缩组p-烯醇化酶表达高于正常对照组。3.COPD骨骼肌萎缩组p-烯醇化酶蛋白浓度与p-烯醇化酶mRNA表达水平一致升高,COPD骨骼肌非萎缩组骨骼肌中p-烯醇化酶蛋白浓度与p-烯醇化酶mRNA表达水平呈升高趋势。结论:1.COPD骨骼肌萎缩组患者股四头肌β-烯醇化酶蛋白浓度及mRNA水平较正常组高,提示COPD骨骼肌萎缩患者p-烯醇化酶表达上调,可能与COPD存在慢性缺氧、骨骼肌类型转换有关;2.COPD骨骼肌萎缩组患者p-烯醇化酶蛋白浓度及p-烯醇化酶mRNA水平较COPD骨骼肌非萎缩组高,p-烯醇化酶蛋白浓度及p-烯醇化酶mRNA水平在两种骨骼肌表型之间存在差异,表明可能不同的调控机制在两种表型对p-烯醇化酶的上调发挥了不同作用;3.萎缩组及非萎缩组骨骼肌p-烯醇化酶蛋白浓度与p-烯醇化酶nRNA水平有一定的正相关性:①萎缩组患者通过增加β-烯醇化酶mRNA的量使p-烯醇化酶蛋白增高,说明DNA层面的调控在p-烯醇化酶的上调中可能起重要作用;②非萎缩组患者β-烯醇化酶mRNA的量有一定程度的升高,相应下游蛋白的表达与正常组比有升高趋势,表明DNA层面有一定的上调作用,同时翻译及其以后的修饰过程效率不高,可能受到某些抑制因素的调控,再者也有可能存在蛋白的过多消耗。4.两种骨骼肌不同表型(萎缩型和非萎缩型)COPD,其下肢骨骼肌p-烯醇化酶的调控机制不同。
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