葛根提取物对子宫内膜癌细胞体外增殖的影响及机理研究

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目的:子宫内膜癌又称子宫体癌,是女性生殖道系统常见的三大恶性肿瘤之一,高发年龄为58~61岁,约占女性癌症总数的7%,已占到女性生殖系统恶性肿瘤的20%~30%。子宫内膜癌是一种起源于子宫内膜的雌激素依赖性恶性肿瘤。近年来,随着激素替代治疗(HRT)广泛应用,子宫内膜癌在我国发病率逐年上升,与宫颈癌比较,已趋于接近甚至超过,受到研究者高度重视。虽然有多家研究机构致力于子宫内膜癌的研究工作,但对其发病机制仍不十分明确。更深入的研究工作仍需要进一步开展。为此,本实验以子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞为研究对象,研究子宫内膜癌的主要发病机制,首次探讨葛根提取物对Ishikawa细胞的影响,以及葛根提取物抑制Ishikawa细胞体外增殖作用机制,为中医药治疗子宫内膜癌提供理论基础和体外实验的资料。方法:1、MTT法分别地检测葛根提取物对Ishikawa细胞体外增殖的抑制作用:不同浓度葛根提取物处理Ishikawa细胞48小时后,测定光吸收值,计算抑制率,获得量效数据。取ICB50B浓度葛根提取物处理Ishikawa细胞24、48、72、96、120小时后,测定光吸收值,计算抑制率,获得时效数据。2、流式细胞术分别测定葛根提取物对Ishikawa细胞周期及凋亡的作用:不同浓度葛根提取物处理Ishikawa细胞48小时后,固定细胞,RNAase消化半小时,PI避光染色1小时,上机检测,Modi Fit软件进行细胞周期分析并绘制DNA分布图。3、RT-PCR法检测葛根提取物、雌二醇、孕激素对Ishikawa细胞ERRαmRNA表达的调节作用:不同浓度葛根提取物、雌二醇、孕激素处理Ishikawa细胞48小时后,提取总RNA,进行RT-PCR反应后,电泳、凝胶图像分析仪器采集图像,分析灰度值。结果:1、葛根提取物对Ishikawa细胞体外增殖作用有明显的抑制作用,并随着药物浓度增加其抑制作用更加明显,在一定浓度范围内均呈剂量依赖性。葛根提取物对Ishikawa细胞体外增殖抑制最显著的时间是加药后48小时,加药后72小时的抑制率虽然有所上升,
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