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目的:本研究拟探讨干细胞相关基因Oct-4在宫颈癌中的表达情况及其与宫颈癌生物学行为和预后的关系。实验材料与方法:应用无血清悬浮培养技术筛选出原代宫颈癌细胞中具有稳定克隆能力的悬浮细胞微球。鉴定原代宫颈癌细胞的Nod/SCID鼠皮下脂肪的成瘤能力,并利用基因芯片方法检测悬浮细胞微球的特异表达基因。通过免疫组化方法分析Oct-4表达与宫颈癌临床病理指标及预后的关系。结果:1、无血清悬浮培养肿瘤干细胞微球在NOD/SCID鼠上形成的肿瘤的能力比宫颈癌细胞明显增强。且基因表达谱以下基因有显著差异:干细胞分化相关基因(CD44,Oct-4);细胞周期调控基因(APC);自我更新相关基因(MYST2,NEUROG2,SOX1)。2、通过基因芯片发现Oct-4基因在肿瘤干细胞微球中的表达明显上调,且明显高于癌旁的非癌组织(45.87%vs.11.9%,P=0.001)。3、Oct-4蛋白的表达与分化程度、临床分级和淋巴结转移显著相关。低分化的病例中Oct-4蛋白的表达率明显高于中高分化的病例(67.8%vs.38.2%vs.18.9%;P=0.001)。淋巴结转移的病例中Oct-4蛋白的表达率明显高于无淋巴结转移的病例(71.4%vs.34.9%,P=0.001)。随着临床分期的提高,Oct-4蛋白的表达率明显上升(57.5%vs.43.0%vs.40.7%forstageII,I,0,P=0.01)。4、630例总体病例中Oct-4蛋白表达阳性患者术后5年生存率与Oct-4蛋白表达阴性患者术后5年生存率有统计学差异(36.7%vs.67.7%,P=0.001)。5、我们应用COX回归模型进行分析,发现组织学类型,临床分期,淋巴结转移, Oct-4表达对宫颈癌预后有统计学意义。结论:1、同等浓度下,无血清悬浮培养的宫颈癌干细胞微球在NOD/SCID鼠上的成瘤能力比宫颈癌细胞的成瘤能力明显加强。2、肿瘤干细胞微球的基因谱与宫颈癌细胞的基因谱存在多种差异。Oct-4基因在宫颈癌无血清悬浮培养肿瘤细胞微球中的表达明显上调,与宫颈癌的生物学行为有密切关系。3、Oct-4蛋白阳性表达与年龄和组织学分型无显著联系,但在病理组织分化程度低,有淋巴结转移,临床分期高的肿瘤中表达明显提高,存在统计学差异。4、Oct-4阳性表达患者5年生存率明显低于阴性患者,通过检测宫颈癌中Oct-4蛋白的表达情况,对判断宫颈癌恶性程度及预后有重要意义。5、组织学类型、临床分期、淋巴结转移、Oct-4的表达是宫颈癌独立的预后因素。