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目的：体外培养小鼠精原干细胞(mouse spermatogonial stem cells,mSSCs),并通过全反式视黄酸(ATRA, all-trans retinoic acid)进行诱导分化,观察小鼠精原干细胞在诱导中的变化情况,检测Stra8、mina53、Oct-4、GCNF在mSSCs体外分化中的表达,有助于研究精原干细胞体外分化的最佳条件和分子生物学特性,从精原干细胞体外分化的角度理解和认识此过程基因表达调控机制方法：本研究体外分离培养6-8天BABL/C小鼠睾丸的SSCs,进行形态学鉴定,并通过含10% FBS、ATRA浓度为1.0×10-5mol/L的L-DMEM培养基对精原干细胞进行体外诱导分化,观察mSSCs加入诱导剂后的形态学变化,用间接免疫荧光技术从c-kit、Oct-4、GCNF三个标志物表达情况观察诱导分化情况,通过RT-PCR检测mSSCs诱导分化前后(0h,2h,12h,3d,5d) Stra8、mina53、Oct-4、GCNF的mRNA的水平,初步了解Stra8、mina53、Oct-4、GCNF的表达状况,以及与mSSCs体外分化的相关情况。结果：1、形态学变化显示ATRA使mSSCs向精母细胞方向发生了分化,并通过间接免疫荧光反应进行鉴定；2、Stra8在mSSCs诱导分化2 h、12 h、3 d、5 d的水平高于成年小鼠和未诱导分化的水平,其中12h的表达水平最高,3d、5d时水平低于2 h,各对照组间差异具有统计学显著性；mina53的表达在诱导后增加,其中诱导2 h、12h时水平高于3d、5d及成年小鼠和未诱导mSSCs的水平,但诱导3d、5d组与成年小鼠组差异不具统计学显著性。3、Oct-4在1nSSCs诱导前呈表达水平最高,诱导2h、12h后下降,3d组和5d组均为阴性。4、GCNF的表达在诱导2h后表达开始增强,3d时表达水平最高,而5d时表达为阴性,在诱导组与成年小鼠睾丸之间表达差异具有显著统计学意义。结论：(1)ATRA在体外诱导mSSCs分化成功。(2)Stra8基因在ATRA诱导mSSCs体外分化中可能发挥了启动减数分裂的作用,但Stra8、mina53基因在SSCs分化中的表达是否具有相关性是不能确定的。(3)在ATRA诱导mSSCs体外分化过程中,GCNF和Oct-4的表达呈负相关。