【摘 要】
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酸枣(Zizyphus spinosus Hu)为鼠李科(Rhamnaceae)枣属(Zizyphus Mill.)植物,为枣的原生种,起源于我国,栽培历史悠久。丛枝菌根(Arbuscular Mycorrhiza,AM)是植物在长期的生
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酸枣(Zizyphus spinosus Hu)为鼠李科(Rhamnaceae)枣属(Zizyphus Mill.)植物,为枣的原生种,起源于我国,栽培历史悠久。丛枝菌根(Arbuscular Mycorrhiza,AM)是植物在长期的生存过程中,与丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhizal Fungi,AMF)一起共同进化的结果,是一种有益共生体,它的存在有利于提高植物抵御不良环境的能力,促进植物生长。本试验以酸枣实生苗为试材,接种AMF,在NaCl胁迫条件下,对其植株总RNA进行了提取和纯度鉴定,并将RNA反转录为cDNA,借助cDNA-AFLP技术对耐盐基因的表达进行了研究。旨在为进一步进行枣分子生物学研究及筛选克隆菌根酸枣耐盐基因,揭示菌根酸枣耐盐性分子机理奠定基础。通过cDNA-AFLP分析,主要研究了酸枣在被菌根真菌侵染后和盐胁迫下的差异表达。获得如下结果:1.采用改良CTAB法提取了酸枣幼苗总RNA,用DNaseⅠ去除RNA中的DNA后,选用M-MLV反转录酶合成了cDNA第一链,片段大小在100～1500bp之间,可以满足下一步cDNA分析试验的要求。2.对9个MseⅠ和12个EcoRⅠ引物组合的共计96对AFLP引物进行了筛选,共得到23对扩增效果较好的AFLP引物,扩增出6种cDNA-AFLP显示类型。3.对第1种差异显示类型的1号(E41/LM1)差异带进行了回收与二次扩增,并进行了测序和序列分析。最终得到一条长度为437bp的表达序列,在NCBI站上经BALASTN比对分析,与其它植物的耐盐基因或已知基因序列没有同源性,仅检测出一个同源性较高的藻类的一个表达序列(CX943087.1),同源性为96%。此序列可能来源于一个与菌根酸枣耐盐性相关的特有新基因。
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