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膝关节骨性关节炎(Knee ostarthritis,以下简称KOA)是一种慢性骨关节病,又称增生性膝骨关节炎,是骨伤科常见病和多发病。其病理特征为关节软骨出现原发性或继发性退行性变,并在关节边缘有骨赘形成。临床上以膝关节疼痛、肿胀、活动受限为主要表现,严重影响着中老年人的正常工作和生活,给个人、家庭和社会带来沉重的负担。目前临床上治疗KOA,通常给予镇痛剂、非甾体药、关节内注射透明质酸钠及手术治疗等,这些治疗方式虽然可以暂时缓解或消除KOA的临床症状,但对其整体病程却并不产生影响,且费用昂贵。该病在中医属“痹症”、“骨痹”范畴,最早记载于《内经》。《素问·痹论》曰:“风寒湿三气杂至,合而为痹”,“痹在于骨则重,在脉血凝而不流,在筋则屈不伸。”治疗上多采用补益肝肾、活血通络、散寒除湿、益气养血等方法治疗。骨关节炎的发病机理至今尚未完全阐明。现代研究中发现,膝骨关节炎是以关节软骨降解为主要病理基础。而MMP-3是关节软骨基质降解中最重要的酶之一。近年来,随着我国中医药理论研究与临床研究的不断深入,导师李引刚主任医师根据民间验方采用以铁牛七为主的复方酊剂治疗KOA,临床观察具有良好的止痛消肿作用,在多年的治疗骨痹过程中,疗效满意,并且患者反映良好。 目的:探讨铁牛七及铁牛七复方酊剂对兔膝骨关节炎关节液MMP-3关节软骨的影响,为临床应用铁牛七复方酊剂治疗KOA提供实验依据。 方法:参照日本鬼头康彦的造模方法:将1.6%的木瓜蛋白酶生理盐水0.5ml注入兔膝关节腔,隔3天注射一次,(1d,4d,7d),连续三次,根据临床上超疲劳活动容易提前出现关节炎的发病特点,每日强迫兔活动30MIN,此造模方法成熟,可靠,操作性强,具有可重复性。造模成功1周后,用8%硫化钠脱毛剂脱去右后腿膝关节部位2cm×3cm毛,保护去毛部位皮肤无破损。(A组)空白组:不做任何处理,正常饲养。(B组)造模对照组:造模成功后,不做任何处理,正常饲养。(C组)单味铁牛七酊组:给予相当人5ml铁牛七酊的动物量,涂抹兔膝周围,早晚各用一次药,连续用药14天。(D组)复方铁牛七酊组:给予相当人5ml复方铁牛七酊的动物量,涂抹兔膝周围,早晚各用一次药,连续用药14天。(E组)消肿止痛酊组:涂抹兔膝周围,用量按说明用,连续用药14天。 实验用材及处理方法:关节液抽取方法:由助手按住动物于固定台上,穿刺者清理实验兔右膝关节穿刺点周围兔毛,再进行穿刺点部位消毒,伸直兔膝关节,从髌旁外侧斜行刺入,有落空感后停止回抽无血液,用5ml注射器向关节腔注入1ml生理盐水,被动活动膝关节数次,再进行穿刺,抽积关节液约0.5~1ml。将抽取的关节液3000r/min离心5min,吸取上清液,于-20℃保存,待测。关节液中的MMP-3含量采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定。 统计学方法:采用 SPSS17.0统计分析软件进行统计分析,数据以平均值±标准差(-x±s)表示,组间差异采用t检验分析。 实验结果:复方铁牛七组的治疗效果优于单味铁牛七酊组和消肿止痛酊组,单味铁牛七酊组的治疗效果优于消肿止痛酊组。因此根据此结论我们推测:降低关节液中MMPS-3的含量,减轻兔膝关节滑膜炎症,是治疗膝骨性关节炎的重要举措。 结论:复方铁牛七组的治疗效果优于单味铁牛七酊组和消肿止痛酊组,单味铁牛七酊组的治疗效果优于消肿止痛酊组。因此根据此结论我们推测:降低关节液中MMPS-3的含量是治疗膝骨性关节炎的重要举措。而单味铁牛七酊和复方铁牛七酊能够降低关节液中MMP-3的含量,尤其是复方铁牛七酊剂效果更加显著。